115年:(醫檢)血液(1)

在臺灣使用的手工凝聚胺試驗( modified manual polybrene test ),下列敘述何者錯誤?

A紅血球試劑和病患血清置於低離子介質中混合,可加速抗體吸附紅血球
B加入凝聚胺之目的是使紅血球產生凝聚
C加入檸檬酸鈉之目的是驅散紅血球的非特異性凝聚
D可檢測出 anti-K抗體

詳細解析

本題觀念:

本題考查的是手工凝聚胺試驗 (Manual Polybrene Test, MPT) 的檢驗原理及其臨床應用限制。這是一種快速的紅血球抗體篩檢與交叉試驗方法,利用帶正電荷的高分子聚合物來縮短抗原抗體反應時間並增強凝集反應。

選項分析

  • A. 紅血球試劑和病患血清置於低離子介質中混合,可加速抗體吸附紅血球正確

    • 低離子介質 (Low Ionic Medium, LIM) 的作用是降低溶液的離子強度,減少紅血球周圍的離子雲 (ionic cloud),從而降低 Zeta 電位。這能減少陽離子對抗體的屏蔽效應,使得帶負電的抗體更容易接近並結合到紅血球抗原上,加速第一階段的致敏 (sensitization) 過程。
  • B. 加入凝聚胺之目的是使紅血球產生凝聚正確

    • 凝聚胺 (Polybrene, hexadimethrine bromide) 是一種帶正電荷的四級銨聚合物。加入後,它會中和紅血球表面唾液酸 (sialic acid) 的負電荷 (即中和 Zeta 電位),導致紅血球之間的排斥力消失,使紅血球發生非特異性的凝聚 (non-specific agglutination)。此步驟是為了讓紅血球彼此極度靠近,進一步促進抗體橋接。
  • C. 加入檸檬酸鈉之目的是驅散紅血球的非特異性凝聚正確

    • 在反應最後階段會加入「再懸浮液 (Resuspending solution)」,其主要成分通常含檸檬酸鈉 (Sodium Citrate) 和葡萄糖。檸檬酸鈉帶負電,能中和或置換掉結合在紅血球上的 Polybrene,恢復紅血球表面的負電荷。
    • 這會導致非特異性凝聚 (由 Polybrene 引起) 散開;但如果血清中存在特異性抗體且已與紅血球抗原緊密結合 (特異性凝集),則這些凝集塊不會散開,藉此區分陽性與陰性反應。
  • D. 可檢測出 anti-K抗體錯誤

    • 這是手工凝聚胺試驗最著名的缺點與限制。MPT 對於 Kell 血型系統 (如 anti-K) 的抗體檢測敏感度極差。
    • 文獻指出,單獨使用 Polybrene 法容易漏測 anti-K,必須加做抗球蛋白試驗 (AHG test) 才能有效檢測。因此,在臨床血庫作業中,若僅依賴 Polybrene 法而未加做 AHG,極可能造成 Kell 系統抗體的偽陰性結果。

答案解析

本題要求選出錯誤的敘述。選項 A、B、C 均正確描述了 MPT 的反應原理步驟 (LIM 加速致敏 \rightarrow Polybrene 引起非特異凝集 \rightarrow 檸檬酸鹽驅散非特異凝集)。唯獨選項 D 錯誤,因為手工凝聚胺試驗的主要臨床限制就是對 Kell 系統抗體 (Anti-K) 不敏感,無法可靠檢測出此類抗體。

核心知識點

  1. MPT 試驗原理三部曲
    • LIM (低離子介質):降低離子強度,加速抗體吸附 (Sensitization)。
    • Polybrene (凝聚胺):中和表面負電荷,引起所有紅血球非特異性聚集 (Aggregation)。
    • Resuspending Solution (再懸浮液/檸檬酸鈉):中和 Polybrene,驅散非特異性聚集,保留特異性抗原抗體凝集 (Disaggregation)。
  2. MPT 的主要限制:對 Kell 系統 (Anti-K) 敏感度低,易產生偽陰性。
  3. 其他特性:MPT 對 Rh 系統抗體、Cold antibodies (冷型抗體) 敏感度高,但對於 Kidd 系統有時亦可能不穩定,最經典的考點仍是 Kell 系統的漏測。

參考資料

  1. Lalezari P, Jiang AF. The manual polybrene test: a simple and rapid procedure for detection of red cell antibodies. Transfusion. 1980
  2. Comparison of a modified manual hexadimethrine bromide (Polybrene) and a low-ionic-strength solution antibody detection technique