下列那一個染劑，較不適合用於血清蛋白電泳（ serum protein electrophoresis ）分析？

本題觀念：

本題考查的是血清蛋白電泳（Serum Protein Electrophoresis, SPE）中用於顯現蛋白質條帶的染色劑特性。血清蛋白電泳的主要目的是分離並觀察血清中的蛋白質（如白蛋白、$\alpha$1、$\alpha$2、$\beta$、$\gamma$球蛋白），因此必須使用能與蛋白質（氨基酸殘基）結合的染劑。若染劑主要針對非蛋白質成分（如脂質），則不適合用於標準的血清蛋白電泳分析。

選項分析

• A. 醯胺黑染劑（Amido Black）：
  • 正確。Amido Black 10B 是一種傳統且常用的蛋白質染劑，常用於醋酸纖維膜（cellulose acetate）或瓊脂凝膠（agarose gel）電泳後的蛋白質染色。它能靈敏地染出血清蛋白的五個主要區帶。
• B. 考馬斯亮藍染劑（Coomassie brilliant blue）：
  • 正確。Coomassie Brilliant Blue（如 R-250 或 G-250）是生物化學中最常見的蛋白質染劑之一，廣泛用於 SDS-PAGE 和瓊脂凝膠電泳。它與蛋白質的鹼性氨基酸（如精氨酸、賴氨酸）結合，靈敏度高，適合用於血清蛋白分析。
• C. 麗春紅染劑（Ponceau S）：
  • 正確。Ponceau S 是一種帶負電的染劑，能快速、可逆地結合帶正電的蛋白質氨基酸殘基。它常用於醋酸纖維膜電泳的血清蛋白染色，也常用於 Western Blot 轉漬後的膜上蛋白質染色（確認轉漬效率）。
• D. 蘇丹黑B染劑（Sudan Black B）：
  • 較不適合（正確答案）。Sudan Black B 是一種脂溶性染劑（Lysochrome），主要用於染色脂質（lipids），例如磷脂、中性脂肪和固醇。在臨床檢驗中，它主要用於**脂蛋白電泳（Lipoprotein electrophoresis）**來觀察脂蛋白（如 HDL, LDL, VLDL）的分布，或是血液抹片中用來鑑別骨髓細胞的脂質顆粒（如鑑別急性骨髓性白血病）。它不與蛋白質骨架結合，因此無法正確顯示標準血清蛋白電泳所需的蛋白質分布圖譜。

答案解析

血清蛋白電泳（SPE）的目的是分析血清中「蛋白質」的含量與分布圖型。選項 A、B、C 均為專門針對蛋白質進行染色的染劑，能正確顯現白蛋白與各球蛋白區帶。選項 D（Sudan Black B） 是專門針對脂質進行染色的染劑，用於「脂蛋白電泳」而非一般的「血清蛋白電泳」。若使用蘇丹黑B染血清蛋白電泳片，僅會染出含有脂質的區帶（脂蛋白），無法完整呈現不含脂質的蛋白質（如白蛋白及其他微量蛋白），故最不適合。

因此，正確答案為 D。

核心知識點

1. 血清蛋白電泳（SPE）常用染劑：

   • Amido Black 10B（醯胺黑）：傳統、染色力強。
   • Ponceau S（麗春紅）：快速、常用於醋酸纖維膜。
   • Coomassie Brilliant Blue（考馬斯亮藍）：靈敏度高，常用於高解析度電泳。
   • 銀染（Silver Stain）：靈敏度極高，用於微量蛋白分析（但在常規臨床 SPE 較少用）。

2. 脂蛋白電泳（Lipoprotein Electrophoresis）常用染劑：

   • Sudan Black B（蘇丹黑 B）：最常用，染脂質。
   • Oil Red O（油紅 O）：染中性脂肪。
   • Fat Red 7B。

3. 觀念區分：考試時需區分「測蛋白質」還是「測脂質/脂蛋白」，以此決定對應的染劑。

參考資料

1. Electrophoresis Staining Methods. Thermo Fisher Scientific. 連結
2. Sudan Black B Staining: Principle, Procedure, Results, Uses. Microbe Notes. 連結
3. Ponceau S usage. Conduct Science. 連結