115年:(醫檢)生化(1)

有關Jaffe reaction 測定creatinine 的干擾物中,下列何者會產生負干擾( negative interference )?

Aacetoacetate
Bhemoglobin F
Cketone bodies
Dbilirubin

詳細解析

本題觀念:

Jaffe reaction (鹼性苦味酸法) 是測定血清或尿液中 Creatinine (肌酸酐) 最傳統且常用的方法。其原理是 Creatinine 與 Picric acid (苦味酸) 在鹼性環境下反應,生成橘紅色的 Creatinine-picrate complex (Janovski complex),並在波長 500-520 nm 處偵測吸光度變化。

此反應最大的缺點是缺乏特異性 (Non-specificity),檢體中許多物質會與試劑反應或干擾吸光度,造成正干擾 (假性偏高)負干擾 (假性偏低)

選項分析:

  • (A) Acetoacetate (乙醯乙酸)錯誤。 Acetoacetate 是一種 Ketone body (酮體)。在 Jaffe reaction 中,Acetoacetate 會與鹼性苦味酸反應生成有色產物,且反應速度比 Creatinine 快 (但在動力學法中仍會被偵測到),導致測得的吸光度增加,產生正干擾 (Positive interference),使 Creatinine 數值假性偏高。

  • (B) Hemoglobin F (胎兒血紅素)錯誤。 Hemoglobin (血紅素) 本身有顏色,且蛋白質可能會與鹼性苦味酸產生反應 (Jaffe-positive chromogens)。一般而言,溶血 (Hemolysis) 會因血紅素的顏色疊加或反應而造成正干擾 (Positive interference)。雖然在某些特定的動力學方法或雙波長偵測下,大量的 Hb 可能因背景扣除問題產生負偏差,但在傳統 Jaffe 反應的教學與考題中,Hb 通常被歸類為正干擾或需透過去蛋白/動力學法校正的物質,並非典型的負干擾代表。

  • (C) Ketone bodies (酮體)錯誤。 同選項 (A),Ketone bodies (主要包含 Acetoacetate 和 Acetone) 屬於 Jaffe-positive chromogens (非肌酸酐呈色劑)。它們會與試劑反應產生顏色,造成正干擾 (Positive interference),導致 Creatinine 數值假性偏高。

  • (D) Bilirubin (膽紅素)正確。 Bilirubin 是 Jaffe reaction 中最主要的負干擾 (Negative interference) 來源。其機制主要有二:

    1. 氧化褪色:在強鹼環境下,Picric acid 會將黃色的 Bilirubin 氧化成無色或淡綠色的 Biliverdin (膽綠素)。這個氧化過程會導致檢體吸光度下降
    2. 抵銷反應:Bilirubin 吸光度下降的速率會抵銷 Creatinine 生成橘紅色複合物所增加的吸光度,導致最終測得的反應速率或吸光度變化量低於實際值,造成 Creatinine 數值假性偏低

答案解析

Jaffe reaction 的干擾物中,Bilirubin (膽紅素) 因在鹼性環境下被氧化成 Biliverdin,導致吸光度下降,產生顯著的負干擾 (Negative interference)。而 Acetoacetate、Ketone bodies 和 Hemoglobin 通常產生正干擾。故正確答案為 (D)

核心知識點

醫事檢驗師國考重點整理 - Jaffe Reaction 干擾物

  1. 正干擾 (假性偏高, Falsely High)

    • Jaffe-positive chromogens:會與苦味酸反應呈色。
    • 常見物質Acetoacetate (干擾最大)、Acetone (酮體)、Glucose (葡萄糖,高濃度時)、Protein (蛋白質,如白蛋白)、Ascorbic acid (維生素C)、Pyruvate (丙酮酸)、Cephalosporins (頭孢菌素類抗生素)。
  2. 負干擾 (假性偏低, Falsely Low)

    • Bilirubin (膽紅素):最經典的負干擾物 (機制:氧化為 Biliverdin,吸光度下降)。
    • Lipemia (脂血):可能因濁度或置換效應造成干擾,但現代儀器多能校正。
  3. 改善方法

    • 使用 Kinetic Jaffe method (動力學法):利用反應速率差異 (Acetoacetate 反應快,Creatinine 居中,Protein 反應慢) 來減少干擾,但無法完全去除 Bilirubin 干擾。
    • 加入 Ferricyanide (鐵氰化鉀)Bilirubin oxidase:先將 Bilirubin 氧化,消除負干擾 (O'Leary method)。
    • 使用 Enzymatic method (酵素法):特異性較高,較不受上述物質干擾 (除了某些藥物如 Dobutamine)。

參考資料

  1. Interference of Bilirubin in Creatinine Value Measurement by Jaffe Kinetic Method - Semantic Scholar
  2. Exogenous interferences with Jaffe creatinine assays - PMC
  3. Jaffe reaction - Wikipedia