115年:(醫檢)生化(1)
下列何者可用 arsenazo Ⅲ method及o-cresolphthalein complexone (CPC)method檢測?
A鋅
B鎂
C鈣
D銅
詳細解析
本題觀念:
本題主要測驗臨床化學中血清鈣(Total Calcium) 的測定方法。 在自動化生化分析儀上,最常用於測定總鈣濃度的呈色法(Colorimetric method)主要有兩種:
- o-Cresolphthalein Complexone (CPC) 法(鄰甲酚酞錯合酮法)
- Arsenazo Ⅲ 法(偶氮胂Ⅲ法)
這兩種方法都是利用染劑與鈣離子結合產生顏色變化,再經由分光光度計定量。
選項分析
- (A) 鋅 (Zinc):
- 臨床上測定鋅最常用的呈色法通常使用 5-Br-PAPS 或 PAPS 等染劑,或者使用原子吸收光譜法(AAS)。
- 雖然 CPC 在化學上可與多種金屬螯合,但在臨床常規檢驗中,CPC 並非測定鋅的標準方法。
- (B) 鎂 (Magnesium):
- 臨床上測定鎂的常見呈色法為 Calmagite 法、Xylidyl blue(Magon)法或 Methylthymol blue 法。
- Arsenazo Ⅲ 對鈣具有高度特異性,但在測定鈣時,鎂會產生干擾,因此試劑中常需加入 8-hydroxyquinoline 來遮蔽鎂離子,而非用來測定鎂。
- (C) 鈣 (Calcium):
- 正確選項。
- CPC 法:是傳統且廣泛使用的鈣測定法。在鹼性環境下(pH 10-12),CPC 與鈣離子結合形成紫紅色複合物(通常在 570-580 nm 測量)。此法對鎂也有反應,因此需加入 8-hydroxyquinoline 來消除鎂的干擾。
- Arsenazo Ⅲ 法:是較新的改進方法。Arsenazo Ⅲ 與鈣離子在微酸性或中性環境(pH 6左右)結合形成藍紫色複合物(在 650 nm 左右測量)。此法具有較高的特異性與親和力,且試劑穩定性優於 CPC 法,受鎂離子的干擾較小(但仍可能需遮蔽劑)。
- (D) 銅 (Copper):
- 臨床測定銅主要依靠原子吸收光譜法(AAS)或感應耦合電漿質譜法(ICP-MS)。若使用呈色法,常見的是 Di-Br-PAESA 或 Bathocuproine 等試劑。
答案解析
答案為 (C) 鈣。 題目詢問哪一種檢驗項目同時可用 Arsenazo Ⅲ 及 o-cresolphthalein complexone (CPC) 檢測,這兩者正是臨床化學實驗室中測定總鈣 (Total Calcium) 最具代表性的兩種呈色法。
核心知識點
- 血清鈣測定方法比較:
- CPC 法 (o-Cresolphthalein Complexone):
- 原理:鹼性環境下與 Ca²⁺ 形成紫色複合物。
- 缺點:試劑吸收二氧化碳後易不穩定、易受溫度影響、需排除鎂離子干擾(使用 8-hydroxyquinoline)。
- Arsenazo Ⅲ 法:
- 原理:在弱酸性或中性環境下與 Ca²⁺ 形成藍紫色複合物(具特異性)。
- 優點:試劑較穩定、受干擾較少(尤其是黃疸或溶血的干擾較低)、結合力強。
- CPC 法 (o-Cresolphthalein Complexone):
- 干擾排除:這兩種方法在測定鈣時,最主要的潛在干擾物都是鎂 (Mg²⁺),因此試劑配方中通常都會包含 8-hydroxyquinoline (8-HQ) 作為遮蔽劑以螯合鎂。
- 檢體要求:
- 不可使用 EDTA、草酸鹽 (Oxalate) 或 檸檬酸鹽 (Citrate) 抗凝劑,因為它們會螯合鈣離子導致結果偽低。
- 建議使用 肝素鋰 (Lithium Heparin) 或血清。
參考資料
- Arsenazo III: an improvement of the routine calcium determination in serum
- Comparison between Serum Calcium Levels Measured Using Direct Ion-selective Electrodes and Photometric Method in Automated Analyzers
- Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics - Calcium measurement methods (General Reference)