110年:藥學二(第2次)

玻尿酸( hyaluronic acid )為多醣類化合物,其分離純化以下列何者最適當?

A正相液相層析法
B離子交換層析法
C逆相液相層析法
D分子篩層析法

詳細解析

本題觀念:

本題考查的是生物大分子(特別是多醣體)的分離與純化技術。 玻尿酸(Hyaluronic acid, HA),又稱透明質酸,是一種高分子的糖胺聚醣(Glycosaminoglycan),由葡萄糖醛酸(D-glucuronic acid)和 N-乙醯葡萄糖胺(N-acetyl-D-glucosamine)雙醣單元重複連接而成。其主要物理化學特性為:

  1. 極高分子量:通常在 10510^510710^7 Da 之間,屬於巨分子。
  2. 高極性與水溶性:含有大量的羥基(-OH)和羧基(-COOH),極易溶於水。
  3. 帶負電:在生理 pH 下,羧基解離帶負電(聚陰離子)。

針對此類高分子量、水溶性生物聚合物,最常用且標準的分離純化與分子量測定方法是基於「分子大小」的層析技術。

選項分析

  • (A) 正相液相層析法 (Normal Phase Liquid Chromatography, NPLC)
    • 原理:固定相為極性(如 Silica),移動相為非極性或低極性有機溶劑(如 Hexane)。
    • 分析:玻尿酸為高極性且水溶性的大分子,不溶於正相層析常用的有機溶劑。若使用此法,玻尿酸無法溶解或會直接沉澱,且會強烈吸附在極性固定相上無法沖提。此法通

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