109年:營養生理生化(2)
在進行聚合酶鎖鏈反應(polymerase chain reaction, PCR )實驗時,除了加入Taq聚合酶、dNTP外,尚須加入下列何種物質方可進行反應?
ADNA引子(DNA primer )
BRNA引子(RNA primer )
C鈣離子
DNTP
詳細解析
本題觀念:
本題考查的是 聚合酶連鎖反應(Polymerase Chain Reaction, PCR) 的核心實驗原理與組成成分。PCR 是一種在試管中(in vitro)大量複製特定 DNA 片段的技術,其模擬了細胞內的 DNA 複製過程,但針對實驗需求進行了簡化與修飾。
選項分析
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A. DNA引子(DNA primer):正確。
- 在 PCR 反應中,聚合酶(如 Taq polymerase)無法從無到有合成新股 DNA,必須藉由一段短的單股核酸序列提供 3'-OH 端才能開始延伸。
- 雖然細胞內的 DNA 複製(in vivo)是使用 RNA 引子,但在人工的 PCR 實驗中,科學家使用人工合成的 DNA 引子(Oligonucleotides)。
- 理由:DNA 引子比 RNA 引子化學性質更穩定(RNA 易被分解),且合成成本較低、保存容易,能精確結合在目標 DNA 序列兩端。
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B. RNA引子(RNA primer):錯誤。
- 這是生物體內(細胞內)自然 DNA 複製時使用的引子,由引子酶(Primase)合成。但在 PCR 實驗中,因 RNA 不穩定且容易被 RNase 降解,故不使用 RNA 引子,而是使用設計
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