108年:醫學一(2)
下列那⼀種⽣化實驗技術無法直接應⽤於蛋⽩質⾝分鑑定?
A⻄⽅墨點法( Western blot analysis )
B質譜法( mass spectrometry )
C分⼦篩管柱層析法( size-exclusion chromatography )
D胺基端序列分析( N-terminal sequencing )
詳細解析
本題觀念:
本題考查的是蛋白質身分鑑定(Protein Identification)的核心原理。蛋白質的「身分鑑定」通常指的是確定該蛋白質的氨基酸序列或確認其具備特定的抗原表位(Epitope),從而將其與其他蛋白質區分開來。僅憑物理性質(如分子量、大小、帶電量)通常無法「唯一」確認蛋白質的身分,因為許多不同的蛋白質可能具有相似的物理特性。
選項分析
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A. 西方墨點法(Western blot analysis):正確,可鑑定。
- 此技術利用**特異性抗體(Antibody)**與目標蛋白質進行抗原-抗體結合。
- 因為抗體能辨識特定的蛋白質表位,加上電泳分離提供的分子量資訊,能提供極高的專一性來確認蛋白質的「身分」。
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B. 質譜法(Mass spectrometry, MS):正確,可鑑定。
- 這是目前蛋白質體學(Proteomics)中鑑定的黃金標準。
- 透過測量胜肽片段的質荷比(m/z ratio),並與資料庫比對(Peptide Mass Fingerprinting)或進行串聯質譜(MS/MS)定序,能直接獲得部分或完整的氨基酸序列資訊,從而精準鑑定蛋白質身分。
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**C. 分子篩管柱層析法(Size-exclusi
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