108年:醫學一(2)

下列 A到D蛋⽩質的混合物,在適當的條件下,以凝膠過濾⾊層分析法( gel filtration chromatography )分離時,第⼆順位沖提出來的蛋⽩質 為何?

A細胞⾊素 c(cytochrome c)Mr=13,000
B免疫球蛋⽩ G(immunoglobulin G )Mr=145,000
C核醣核酸 酶A(ribonuclease A )Mr=13,700
D核醣核酸聚合 酶(RNA polymerase )Mr=450,000

詳細解析

本題觀念:

本題的核心觀念為 凝膠過濾色層分析法(Gel Filtration Chromatography),又稱為 分子篩層析(Molecular Sieve Chromatography)或 大小排除層析(Size-Exclusion Chromatography, SEC)。

分離原理: 此技術利用具有特定孔徑大小的多孔珠子(porous beads,固定相)來分離混合物中的分子。

  1. 大分子(Large molecules):無法進入珠子的孔隙內部,只能在珠子之間的空隙(void volume)流動。因此它們的路徑最短,流速最快,最先被沖提(elute)出來。
  2. 小分子(Small molecules):可以自由進出珠子的孔隙內部,在管柱中行進的路徑較長(包含珠子內部與外部),因此流速較慢,較晚被沖提(elute)出來。

沖提順序(Elution Order): 分子量由大至小(Largest MW \rightarrow Smallest MW)。

  • 分子量最大 \rightarrow 第一順位沖出
  • 分子量最小 \rightarrow 最後順位沖出

選項分析

根據題目給予的分子量(MrM_r)資訊,將四種蛋白質由大至小排列,以

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