107年:醫學一(2)
以凝膠電泳法( gel electrophoresis )分離蛋白質時,加入 SDS (sodium dodecyl sulfate )的目的為何?
A用以決定一個蛋白質的等電點( isoelectric point )
B用以決定一個蛋白質的特異活性( specific activity )
C用以保護蛋白質的生物結構和活性
D用以決定蛋白質分子量
詳細解析
本題觀念:
SDS-PAGE (Sodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide Gel Electrophoresis) 本題的核心觀念在於理解 SDS-PAGE 電泳技術中,SDS (Sodium Dodecyl Sulfate,十二烷基硫酸鈉) 這種陰離子界面活性劑(anionic detergent)的生化作用機制。
選項分析
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A. 用以決定一個蛋白質的等電點(isoelectric point)
- 錯誤。決定蛋白質等電點(pI)的技術是等電聚焦電泳(Isoelectric Focusing, IEF)。
- 在 IEF 中,我們不加入 SDS,而是利用蛋白質原本帶有的電荷,在 pH 梯度的膠體中移動,直到蛋白質到達淨電荷為零的 pH 值位置(即 pI)才會停止。
- 若加入 SDS,SDS 會帶有強負電並結合在蛋白質上,這會掩蓋蛋白質原本的電荷特性,使所有蛋白質都變成帶負電,導致無法測得其原本的等電點。
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B. 用以決定一個蛋白質的特異活性(specific activity)
- 錯誤。特異活性是指單位質量的蛋白質(通常是酵素)所具有的生物活性。
- SDS 是一種強力的**變性劑(denat
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