110年:(醫檢)檢驗(2)

表觀遺傳( epigenetic modification ),尤其是 DNA 甲基化( methylation ),已被列為急性骨髓性白血病染色體及基因變異的五大類項之一。下列何種試藥可以將未被甲基化的胞嘧啶 (C) 轉變成尿嘧啶 (U) ,而使用於分析甲基化的分子檢驗中?

A二甲基亞硫( DMSO )
B乙二胺四乙酸( EDTA )
C二乙基亞硝胺( DEN )
D重亞硫酸鹽( bisulfite )

詳細解析

本題觀念:

本題考查的是表觀遺傳學 (Epigenetics) 中檢測 DNA 甲基化 (DNA methylation) 的標準分子生物學技術——重亞硫酸鹽定序法 (Bisulfite Sequencing) 的化學原理。

在 DNA 甲基化分析中,最關鍵的挑戰是如何區分「甲基化的胞嘧啶 (5-mC)」與「未甲基化的胞嘧啶 (C)」,因為兩者在標準 PCR 和定序中配對規則相同(都與鳥嘌呤 G 配對)。為了解決這個問題,科學家利用特定的化學試劑在定序前對 DNA 進行修飾處理。

選項分析

  • A. 二甲基亞硫( DMSO ):

    • 錯誤。 DMSO (Dimethyl sulfoxide) 是一種極性溶劑。
    • 在分子生物學中,它常被添加於 PCR 反應中以減少 DNA 二級結構的形成(特別是高 GC 含量的模板),或作為細胞凍存時的抗凍劑(cryoprotectant)。
    • 雖然有研究顯示 DMSO 處理細胞本身可能會影響細胞內的表觀遺傳修飾,但它並不是用來「化學轉化」胞嘧啶的試劑。
  • B. 乙二胺四乙酸( EDTA ):

    • 錯誤。 EDTA 是一種金屬離子螯合劑(chelating agent)。
    • 它主要用於捕捉溶液中的

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