110年:(醫檢)檢驗(2)
下圖是以聚合酶連鎖反應檢測腦脊髓液中單純皰疹病毒( Herpes Simplex Virus, HSV )的電泳分析結果。關於此試驗的敘述,下列何者最不適當? 
A是巢式多套式反轉錄聚合酶連鎖反應的結果
B對照組 1是陽性對照組
C對照組 2及所有檢體都有添加內部控制( internal control ) DNA
D對照組 3的目的是檢測試劑是否污染
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本題觀念:
本題主要考驗對 單純皰疹病毒 (HSV) 的病毒特性(DNA 病毒)以及 聚合酶連鎖反應 (PCR) 原理的理解,特別是 巢式 PCR (Nested PCR) 與 多重 PCR (Multiplex PCR) 的判讀。
- 病毒特性:HSV (Herpes Simplex Virus) 屬於 雙股 DNA 病毒 (dsDNA virus)。因此,檢測其核酸時,直接提取 DNA 進行 PCR 擴增即可,不需要 經過反轉錄 (Reverse Transcription, RT) 步驟。RT-PCR 是用於檢測 RNA 病毒(如流感病毒、新冠病毒、腸病毒等)。
- PCR 方法:
- 巢式 PCR (Nested PCR):利用兩對引質 (Outer & Inner primers) 進行兩輪擴增,第一輪產物作為第二輪的模板。此法可大幅提高檢測的 靈敏度 (Sensitivity) 與 特異性 (Specificity),常態用於腦脊髓液 (CSF) 中微量病毒的檢測。
- 多重 PCR (Multiplex PCR):在同一反應管中加入多對引質,同時擴增多個標的(此題為 HSV 與 內部控制 Internal Control)。
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