110年:(醫檢)檢驗(2)
承上題【下圖是以聚合酶連鎖反應檢測腦脊髓液中單純皰疹病毒( Herpes Simplex Virus, HSV )的電泳分析結果。關於此試驗的敘述,下列何者最不適當?】,檢體的檢測結果判讀,下列何者正確? 
A本次檢測無效
B檢體 1為偵測不到 HSV
C檢體 2為 HSV陽性
D檢體 3為偵測不到 HSV
詳細解析
本題觀念:
本題考查的是 聚合酶連鎖反應 (PCR) 的結果判讀,特別是 巢式 PCR (Nested PCR) 與 內部控制 (Internal Control, IC) 的應用。
在臨床病毒學檢驗中(如 HSV 檢測),為了提高靈敏度與特異性,常使用兩輪 PCR (Nested PCR)。
- 巢式 PCR (Nested PCR):
- 第一輪使用外圍引子對 (Outer primers: OF/OR) 擴增較大的片段。
- 第二輪使用內部引子對 (Inner primers: IF/IR) 以第一輪的產物為模板進行擴增,得到較小的特異性片段。這能大幅減少非特異性產物的干擾並提高靈敏度。
- 內部控制 (Internal Control, IC):
- 為了避免「偽陰性」(False Negative) 的結果(例如檢體中含有 PCR 抑制物質),反應中會加入一組內部控制引子 (ICF/ICR) 與模板。
- 若檢體為陰性(無病毒),則必須出現 IC 的條帶,證明 PCR 反應本身運作正常且無抑制。
- 若檢體為強陽性,IC 條帶有時會因競爭效應變弱或消失,這仍判為陽性。
影像分析:
- 引子說明 (Legend):
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