以single-strand conformation polymorphism （ SSCP ）偵測 single nucleotide polymorphism （ SNP ）時，含 SNP 的待測雙股 DNA片段通常以下列何種條件將雙股 DNA 變性成單股 DNA ？

本題觀念：

本題考查的是單股構形多型性 (Single-Strand Conformation Polymorphism, SSCP) 技術中，將雙股 DNA (dsDNA) 轉變為單股 DNA (ssDNA) 的關鍵前處理步驟。SSCP 的原理是利用單股 DNA 在非變性膠體中，會依據其核苷酸序列折疊成獨特的二級結構 (secondary structure)，進而影響電泳移動速度。因此，實驗成功的首要條件是有效地將雙股 DNA 變性 (Denaturation) 為單股，並防止其在電泳前重新黏合 (Re-annealing)。

選項分析

• A. 低溫，酸性溶液：錯誤。

  • 低溫：低溫 (如 4°C) 是有利於 DNA 黏合 (Annealing) 形成雙股的條件，而非變性。雖然 SSCP 電泳過程常在低溫下進行以維持單股構形穩定，但在「變性」階段需要高能量來打斷氫鍵。
  • 酸性：DNA 在酸性環境下極不穩定，容易發生去嘌呤作用 (Depurination) 甚至骨架斷裂，破壞 DNA 序列完整性，無法進行後續的突變分析。

• B. 高溫，酸性溶液：錯誤。

  • 雖然高溫可以變性 DNA，但配合酸性溶液會加速 DNA 的水

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