110年:(醫檢)檢驗(1)

下列關於 DNA電泳使用的緩衝液 TAE ( Tris acetate EDTA )以及 TBE ( Tris borate EDTA )的敘述,何者正確?

A電泳後要純化 DNA 最好使用 TAE
B相同電流下 DNA在 TBE 中跑得較快
CTAE緩衝能力較好
D高濃度之 TAE比較容易沉澱

詳細解析

本題觀念:

本題考查的是分子生物學中兩種常見 DNA 電泳緩衝液:TAE (Tris-Acetate-EDTA) 與 TBE (Tris-Borate-EDTA) 的性質比較。醫檢師需了解這兩種緩衝液對 DNA 移動速度、緩衝能力、解析度以及後續應用(如純化、選殖)的影響,以依據實驗目的選擇合適的緩衝液。

選項分析

  • A. 電泳後要純化 DNA 最好使用 TAE(正確)

    • 原因:若實驗目的是從膠體中回收 DNA (Gel extraction) 進行後續反應(如 Ligation 選殖),TAE 是首選。
    • 機制:TBE 中的硼酸鹽 (Borate) 會與瓊脂糖 (Agarose) 中的多醣分子形成複合物,也會與 DNA 結合,這會干擾 DNA 從膠體中的回收效率。此外,殘留的硼酸鹽是許多酵素(如 Ligase, DNA polymerase)的抑制劑,可能影響後續實驗成功率。相比之下,乙酸 (Acetate) 不會有此類干擾。
  • B. 相同電流下 DNA 在 TBE 中跑得較快(錯誤)

    • 修正:在相同條件下,DNA 在 TAE 中跑得較快(約快 10%)。
    • 原因:TBE 中的硼酸鹽會與甘油或瓊脂糖形成複合物,增加了

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