110年:(醫檢)檢驗(1)

DNA桑格定序法( Sanger sequencing )結果分別呈現如下列四選項,何者最可能是核苷酸插入( insertion )或刪去( deletion)突變所造成?

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詳細解析

本題觀念:

桑格定序法 (Sanger Sequencing) 之圖譜判讀 - 異型合子插入或刪除 (Heterozygous Indel)

桑格定序是利用雙去氧核苷酸 (ddNTP) 終止DNA合成的原理進行定序。在臨床檢驗或基因分析中,若受檢者為異型合子 (Heterozygote),即兩條染色體上的對偶基因序列不同,圖譜會呈現特定的疊加訊號:

  1. 單點突變 (SNP/Point Mutation):若僅有一個鹼基改變,圖譜上只會在該特定位置出現雙色峰 (Double peak),前後序列均為單一清晰的波峰。
  2. 插入或刪除 (Insertion/Deletion, Indel):若其中一個等位基因發生了插入或刪除,會導致該位置之後的序列發生移碼 (Frameshift)
    • 現象:從突變點開始,兩條染色體的DNA序列長度不再對齊(一條是正常的,另一條多或少了鹼基)。
    • 圖譜特徵:突變點之前序列清晰單一;突變點之後,圖譜會出現連續且混亂的雙重波峰 (Overlapping peaks),軟體常因無法判讀而標示為連續的 "N"。這是因為兩種不同序列的波峰疊加在一起所致。

影像分析:

  • 選項 A (圖 A)
    • 觀察:序列大

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