染色體 t(9;22)的轉位（ translocation ）突變（費城染色體）造成 BCR-ABL1 的融合蛋白，是急性淋巴白血病常見的突變之一。其中染色體斷裂發生於BCR基因第一外顯子（ exon 1 ）下游與ABL1基因第三外顯子（ exon 3 ）上游是典型的轉位突變之一。如要以反轉錄聚合酶連鎖反應檢驗此突變，下列何種聚合酶連鎖反應的引子設計是最適合的？（ F: forward primer 正向引子； R: reverse primer 反向引子）

本題觀念：

本題考查的核心觀念包含 t(9;22) 染色體轉位（BCR-ABL1 融合基因）的結構、急性淋巴性白血病（ALL）的常見分子變異，以及 RT-PCR（反轉錄聚合酶連鎖反應）的引子設計原則。

選項分析

基本原則： RT-PCR 是以 mRNA 反轉錄成的 cDNA 為模板進行擴增。在 mRNA 的成熟過程中，內含子（intron）已被移除，僅保留外顯子（exon）。因此，為了偵測融合蛋白的 mRNA（cDNA），引子（primer）必須設計在外顯子（exon）上。若設計在內含子上，將無法與成熟 mRNA/cDNA 結合，導致實驗失敗。

• (A) F位在BCR第一外顯子上， R 位於ABL1第二內含子（ intron ）上：

  • 錯誤。反向引子（R）設計在內含子（intron）上，無法結合到 cDNA 模板（因為 intron 已被切除）。

• (B) F位在BCR第一內含子上， R 位於ABL1第三外顯子上：

  • 錯誤。正向引子（F）設計在內含子（intron）上，同樣無法結合到 cDNA 模板。

• (C) F位於BCR第一外顯子上， R 位於ABL1第二外顯子上：

  • 錯誤。
  • 這需要

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