109年:(醫檢)檢驗(2)
關於區分 Extended-spectrum ß-lactamase ( ESBL )的型別,下列何種檢測法最適當?
APCR-RFLP( restriction fragment length polymorphism )
BFISH( fluorescence in situ hybridization)
CPFGE( pulsed-field gel electrophoresis )
DVNTR( variable number tandem repeat )
詳細解析
本題觀念:
廣效 β-內醯胺酶(Extended-spectrum β-lactamase, ESBL)的分型(typing)方法選擇。ESBL 主要由 SHV、TEM、CTX-M 等基因家族編碼,不同型別間可能只有一或數個點突變差異。要準確區分 ESBL 的型別(type/variant),需要能偵測點突變或細微序列差異的方法。
選項分析
(A) PCR-RFLP(restriction fragment length polymorphism,限制酶片段長度多型性分析) PCR-RFLP 先以 PCR 擴增目標基因區段,再用限制酶切割,依據切割片段的大小差異進行分型。ESBL 型別間(如 SHV-1 vs SHV-2、SHV-5 vs SHV-12)的差異通常是點突變,這些點突變會改變或產生特定限制酶識別序列。PCR-RFLP 可精確偵測這種差異,是區分 ESBL 型別的最適方法。已有文獻記載 PCR-RFLP 搭配 DdeI、NheI 等限制酶可鑑別 SHV-1、SHV-2a、SHV-3、SHV-4、SHV-5、SHV-11、SHV-12 等不同型別。
(B) FISH(fluorescence in situ hybridization,螢光原位雜交) FISH 主要用於**偵測特定核酸序列的存在
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