108年:(醫檢)檢驗(2)

基因甲基化常導致抑癌基因的表現下降,下列有關甲基化分子檢驗的敘述,何者錯誤?

A核酸 內切酶Hpa II 只會切割 CCGG 序列而不會切割 C5m CGG
B可以結合 real-time PCR 與high-resolution melting analysis 分析基因的甲基化
CBisulfite 可以使未甲基化的胞嘧啶轉變為腺嘌呤
DGSTP1 基因甲基化的程度可做為攝護腺癌分子檢驗的指標

詳細解析

本題觀念:

本題考查 DNA 甲基化(DNA methylation)的分子檢驗技術,包括 bisulfite 轉化原理、甲基化敏感性限制酶(methylation-sensitive restriction enzyme)的原理、高解析度熔點分析(high-resolution melting analysis, HRMA),以及 GSTP1 基因甲基化在攝護腺癌(prostate cancer)診斷中的應用。此為反向題,問「何者錯誤」。

選項分析

(A) 核酸內切酶 Hpa II 只會切割 CCGG 序列而不會切割 C5mCGG\text{C}^\text{5m}\text{CGG} 正確陳述。HpaII 是甲基化敏感性限制酶(methylation-sensitive restriction enzyme),其辨識序列為 5'-CCGG-3'。當胞嘧啶未甲基化時,HpaII 可正常切割;但若序列為 C5mCGG\text{C}^{5m}\text{CGG}(即內側胞嘧啶被甲基化),HpaII 無法切割。HpaII 的同切酶(isoschizomer)MspI 則無論是否甲基化均可切割 CCGG,兩者組合可用於區分甲基化狀態。

✅ **(B) 可以結合 real-time PCR 與 high-resolution melting analysi

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