肝癌常見的 TP53 基因突變是第 249 密碼子的第三鹼基 G變成 A導致精胺酸變成絲胺酸，下列何種方法最適合用於這樣的鹼基突變檢測？

本題觀念：

TP53 基因第 249 密碼子（codon 249）的第三鹼基 G→A 點突變（R249S：Arg→Ser）是肝癌中最具代表性的熱點突變。針對已知位置的單一鹼基突變（point mutation / SNP），分子檢驗中最精準且直接的方法是單一雙去氧核苷酸延展反應（single dideoxynucleotide extension，又稱 minisequencing 或 SNaPshot），而非利用抗體的蛋白質層次檢測。

選項分析

(A) 組織免疫染色（IHC） IHC 利用抗體辨識蛋白質抗原的表現量或位置，可偵測 p53 蛋白的累積（穩定化）或缺失，但無法區分特定密碼子的鹼基取代。若突變造成蛋白質穩定，IHC 顯示強陽性，但也有其他突變（非 R249S）同樣使 p53 穩定；IHC 無法確認是哪個密碼子、哪個鹼基發生了何種取代。此方法不適合精確的鹼基突變檢測。❌

(B) 螢光原位雜交（FISH） FISH 利用螢光探針偵測染色體層次的基因拷貝數變化（放大、缺失）或基因融合（如 BCR-ABL），無法偵測單一鹼基的點突變。TP53 codon 249 的 G→A 取代屬於 SNP 層次，FISH 解析度遠不足以辨識。❌

**(C) 單一雙脫氧核苷酸延展（single dideoxynucleotide

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