108年:(醫檢)檢驗(1)
下列何種分⼦檢驗的⽅法不需要⽤到切割 步驟？
A單股結構多型性（ Single-strand conformation polymorphism, SSCP ）
B增幅限制 酶切位點（ Amplified created restriction sites, ACRS ）
C化學切割錯誤鹼基（ Chemical cleavage of mismatch duplexes, CCM ）
D限制⻑度多型性（ Restriction fragment length polymorphism, RFLP ）
詳細解析
本題觀念：
本題考各種常見分子基因型鑑定（genotyping）方法中，哪一種不需要使用限制酶（restriction enzyme）進行切割（cleavage）步驟。SSCP 是唯一不依賴任何酵素切割的方法。
選項分析
(A) 單股結構多型性（SSCP） — 正確（本題正確答案）。SSCP 的流程：PCR → 變性（熱或化學法，非酵素）→ 非變性 PAGE 電泳。整個過程完全不需要限制酶或任何其他核酸酶進行切割。
(B) 增幅限制酶切位點（ACRS，Amplified Created Restriction Sites） — 需要切割。ACRS 的原理是在 PCR 引子上設計錯誤配對，使擴增產物帶有人工創造的限制酶辨識序列（restriction enzyme recognition site），隨後必須用限制酶切割 PCR 產物並進行凝膠電泳，依切割與否判斷基因型。切割步驟不可缺少。
(C) 化學切割錯誤鹼基（CCM，Chemical cleavage of mismatch duplexes） — 需要切割。CCM 的核心就是「切割（cleavage）」：先形成含錯誤配對的 heteroduplex，再用羥胺（hydroxylamine）切割 C-T 錯誤配對位點，或用哌啶（piperidine）切割化學修飾後的
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