107年:(醫檢)檢驗(2)
下列何種偵測 single nucleotide polymorphism (SNP )的方法通常不需經電泳或層析儀分析?
APCR-RFLP
BSingle-strand conformation polymorphism
CHeteroduplex mobility analysis
DPCR-allele-specific oligonucleotide hybridization
詳細解析
本題觀念:
偵測單一核苷酸多型性(single nucleotide polymorphism, SNP)的方法各有不同的分析平台需求。其中大多數方法需要電泳(electrophoresis)或層析(chromatography)才能判讀結果,但 PCR-allele-specific oligonucleotide(ASO)hybridization 可透過點墨法(dot blot)直接以雜交信號判讀,不需電泳分離。
選項分析
(A) PCR-RFLP PCR 擴增目標區段後,以限制酶(restriction endonuclease)切割,依 SNP 是否破壞或新增切割位,產生不同長度的片段,必須用凝膠電泳分離片段才能判讀。需要電泳。
(B) Single-strand conformation polymorphism(SSCP) 將 PCR 產物變性成單股 DNA,在非變性聚丙烯醯胺凝膠(non-denaturing polyacrylamide gel)中電泳。單股 DNA 因二級結構不同(SNP 造成折疊形狀改變)而產生不同的電泳移動率(mobility)。必須靠電泳讀取結果。
(C) Heteroduplex mobility analysis(HMA) 將野生型與突變型 PCR 產物混合後變性再退火(r
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