106年:(醫檢)檢驗(2)

下列何種方法最不常用於檢測單核 苷酸多型性( Single nucleotide polymorphism )?

ASequence-specific primer-polymerase chain reaction (SSP-PCR )
BHigh-resolution melting curve analysis
CSingle-strand conformation polymorphism
DcDNA microarray analysis

詳細解析

本題觀念:

單核苷酸多型性(single nucleotide polymorphism, SNP)的各種偵測方法之特性與適用性比較,本題為反向題(問「最不常用」者)。

選項分析

(A) Sequence-specific primer-polymerase chain reaction(SSP-PCR)

正確陳述(常用方法)。SSP-PCR(又稱 allele-specific PCR, AS-PCR)利用 3' 末端針對特定 SNP 等位基因設計的引子,只有在引子末端與模板完全互補時才能有效擴增,藉此區分不同的 SNP 等位基因。此法簡便、成本低,是 SNP 基因型鑑定的常用方法之一,廣泛應用於 HLA 分型及藥物基因組學(pharmacogenomics)。

(B) High-resolution melting curve analysis

正確陳述(常用方法)。高解析熔解曲線分析(high-resolution melting, HRM)透過監測 PCR 產物熔解溫度(Tm)的細微差異來偵測 SNP。不同等位基因的 GC 含量和序列細微差異會使雙股 DNA 的熔解特性不同,HRM 可在封閉管(closed-tube)中進行,無需後續電泳,靈敏度高。此法是 SNP 偵測的常用且高效方法

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