尿液中出現脂肪小滴,可以用下列何種染色來確認?
詳細解析
本題觀念
尿液脂肪尿(lipiduria)指的是尿沉渣中出現脂肪小滴、卵圓形脂肪體或脂肪管型的現象,臨床上常見於腎病症候群、嚴重高血脂或脂肪吸收異常等情況。當一般顯微鏡下觀察到疑似脂肪小滴的圓形折光構造時,仍需借助特殊染色來確認其脂質本質,才能與其他外觀類似的構造(如紅血球、氣泡或結晶)區分開來,這正是本題考核的檢驗技術重點。
Oil Red O 是一種親脂性偶氮染料,其分子在脂質中的溶解度遠高於一般水溶性載劑,染色時會以物理方式(而非化學鍵結)滲入脂肪小滴內部,使當中的中性三酸甘油脂與游離脂肪酸呈現鮮紅至橙紅色,是目前確認尿液脂肪小滴最常用、也已取代 Sudan III/IV 的標準染色法,因其呈色更深、更容易在顯微鏡下判讀。此外,偏光顯微鏡下若見到「馬爾他十字」現象,通常反映的是膽固醇酯因液晶結構產生的雙折射,並非所有脂質皆會出現此現象,因此馬爾他十字只能作為輔助觀察,無法取代 Oil Red O 對中性脂肪的直接染色確認。
選項分析
A:Oil Red O 是親脂性偶氮染料,能以物理方式進入脂肪小滴,使中性三酸甘油脂與游離脂肪酸呈紅至橙紅色,是尿沉渣脂肪小滴確認的標準染色法,為本題正解。
B:Prussian blue(普魯士藍染色)是利用亞鐵氰化鉀與鐵離子反應,生成不溶性藍色亞鐵氰化鐵沉澱,專門用於偵測尿沉渣中的含鐵血黃素,與脂肪小滴的鑑定機轉完全無關,不正確。
C:Liu's stain 主要應用於血液抹片與體液細胞學(如陰道分泌物、痰液、膿液)中血球與細胞形態的鑑別染色,操作快速,並非設計用於脂質或脂肪小滴的確認,不正確。
D:Gram stain 依細菌細胞壁結構區分格蘭氏陽性與陰性菌,屬於微生物鑑定染色,與尿液脂肪小滴的確認機轉無關,不正確。
答案解析
本題正確答案為 A。判斷關鍵在於區分不同染色法的鑑定對象:Oil Red O 針對的是「脂質」本身,利用親脂性染料的物理性溶解滲入原理,讓中性脂肪與游離脂肪酸顯色;Prussian blue 針對的是「鐵」(含鐵血黃素);Liu's stain 針對的是血液與體液中的「細胞形態」;Gram stain 針對的是「細菌細胞壁」。四個選項分屬完全不同的鑑定目標,只要掌握脂肪小滴屬於脂質範疇,便能直接鎖定唯一以脂質為染色標的的 Oil Red O。臨床上腎病症候群病人因大量蛋白尿造成脂質代謝異常,尿中常見脂肪小滴與卵圓形脂肪體,Oil Red O 染色陽性可作為佐證發現。
核心知識點
準備尿沉渣特殊染色考題時,建議把各染色法的鑑定標的整理成對照表:Oil Red O 對應脂質(脂肪小滴、卵圓形脂肪體)、Prussian blue 對應含鐵血黃素、Liu's stain 對應血球與體液細胞形態、Gram stain 對應細菌。此外也要記得偏光顯微鏡下的馬爾他十字現象雖與脂質有關,但僅反映膽固醇酯的雙折射特性,並非所有脂肪小滴都會呈現,因此不能取代 Oil Red O 作為確認脂肪小滴的直接證據,這是常見的鑑別重點。
參考資料
- Wikipedia: Oil Red O. https://en.wikipedia.org/wiki/Oil_Red_O
- Wikipedia: Lipiduria. https://en.wikipedia.org/wiki/Lipiduria
- PathologyOutlines: Oil red O stain. https://www.pathologyoutlines.com/topic/stainsoilredo.html
- Renal Fellow Network: Urine sediment of the month - oval fat bodies. https://www.renalfellow.org/2020/06/25/urine-sediment-of-the-month-all-about-those-oval-fat-bodies/
- LaboratoryInfo: Perls' Prussian blue staining. https://laboratoryinfo.com/perls-prussian-blue-staining/
- Wikipedia: Liu's stain. https://en.wikipedia.org/wiki/Liu%27s_stain