115年:(醫檢)微生(2)

臨床鑑定細菌motility 所使用的洋菜濃度,通常為下列何者?

A0.2%
B0.4%
C0.7%
D1.0%

詳細解析

本題觀念

細菌運動性(motility)測試是臨床微生物實驗室中用來鑑別細菌是否具有鞭毛的基本試驗之一。這項測試的關鍵在於使用半固態培養基(semi-solid medium),其洋菜(agar)濃度必須夠低,讓有運動性的細菌能從接種線(stab line)向外擴散;但又不能低到呈液態,否則無法判讀運動性與非運動性菌株的差異。臨床上最常用的標準濃度為 0.4%,這個數值是醫事檢驗師國考培養基配方的高頻考點。

選項分析

A. 0.2%

0.2% agar 的質地過於稀薄,接近液態,穿刺接種後很難維持清楚的接種線,因此難以區別有運動性的擴散生長與單純的培養基流動。這個濃度較常見於研究用途的 swimming plate assay(游泳平板分析),用來定量評估細菌的趨化(chemotaxis)運動能力,而非臨床常規鑑定所使用。

B. 0.4%

0.4% agar 是臨床 motility test medium 的標準洋菜濃度。FDA 細菌學分析手冊(BAM)M103 配方及市售商品如 HiMedia M260 等均採用此濃度。在 0.4% 的半固態培養基中,穿刺接種後有運動性的細菌會從接種線向外呈放射狀擴散生長,使周圍培養基變得混濁;而無運動性的細菌則僅沿著接種線生長,周圍培養基維持清澈透明,兩者對比鮮明。SIM(sulfide-indole-motility)培養基也使用相近的低洋菜濃度來同時檢測硫化氫產生、indole 反應和運動性。

C. 0.7%

0.7% agar 產生的半固態培養基偏硬,會限制許多有運動性細菌的擴散遷移。這個濃度較常用於研究 swarming motility(群集運動)的實驗中,適合高度運動性的菌種如 Proteus spp.,但不適合作為臨床常規運動性測試的標準濃度,因為會低估一般菌株的運動能力。

D. 1.0%

1.0% agar 已接近標準固態培養基(通常為 1.5% agar)的硬度,培養基過於堅實,有運動性的細菌幾乎無法從接種線向外遷移。在此濃度下進行穿刺接種,無論細菌是否具有鞭毛,生長幾乎都局限在接種線上,導致運動性測試結果不可靠。

答案解析

本題正確答案為 B。臨床鑑定細菌運動性所使用的半固態培養基,標準洋菜濃度為 0.4%。此濃度在維持足夠凝膠結構與允許菌體自由擴散之間取得最佳平衡。一般而言,運動性測試用培養基的 agar 濃度範圍在 0.3%~0.5% 之間,0.4% 為國際公認的標準值。低於 0.3% 太軟不易判讀,高於 0.5% 則過硬會限制菌體移動。

核心知識點

  • 臨床 motility test medium 標準洋菜濃度為 0.4%(半固態培養基)
  • 半固態培養基 agar 濃度範圍 0.3%~0.5%,0.4% 為最常用標準值
  • 有運動性菌株:生長從 stab line 向外擴散,周圍培養基呈混濁
  • 無運動性菌株:僅沿 stab line 生長,周圍維持清澈
  • 0.2% agar 太稀,適用於研究用 swimming plate assay
  • 0.7% agar 偏硬,適用於 swarming motility 研究
  • 1.0% agar 接近固態培養基硬度,不適合 motility 測試
  • SIM medium 同時檢測硫化氫、indole、motility,也使用低濃度 agar
  • 標準固態培養基使用 1.5% agar

參考資料