ExamWise
115年:(醫檢)微生(2)

有關革蘭氏染色法（Gram stain）在臨床微生物診斷上之應用，下列何者最不適當？

A細菌培養過久而老化會改變菌體的染色性
B革蘭氏染色法不適用於對臨床檢體的直接染色鏡檢
C抑制菌體細胞壁合成之抗生素，容易造成革蘭氏陽性細菌對脫色液之敏感性增加
D嗜中性球之細胞核經革蘭氏染色後，常呈粉紅色

詳細解析

本題觀念

革蘭氏染色法（Gram stain）是臨床微生物學實驗室最基本也最重要的染色技術之一。這個方法利用細菌細胞壁結構的差異，將細菌分為革蘭氏陽性（染成紫色）與革蘭氏陰性（染成粉紅色）兩大類。本題考的是革蘭氏染色在臨床微生物診斷上的實際應用，其中一個選項的敘述明顯與事實相反。

選項分析

A. 細菌培養過久而老化會改變菌體的染色性

此敘述正確。細菌培養過久（老化培養）確實會改變革蘭氏染色結果。老化的菌株因為肽聚醣層（peptidoglycan，細胞壁的主要結構成分）逐漸劣化、變薄，導致原本革蘭氏陽性的細菌可能變成革蘭氏陰性，或呈現革蘭氏不定性（gram-variable，就是有時染出陽性、有時染出陰性的不穩定狀態）。因此，進行革蘭氏染色時建議使用 12 至 18 小時的年輕培養物，以避免誤判。

B. 革蘭氏染色法不適用於對臨床檢體的直接染色鏡檢

此敘述最不適當，為本題答案。事實上，革蘭氏染色直接塗片（direct smear）是臨床微生物實驗室最基本的快速檢查方法，廣泛適用於各種臨床檢體，例如腦脊髓液（CSF）、痰液、尿液、膿液、傷口分泌物等。透過直接染色鏡檢，臨床人員可以在數分鐘內初步判斷致病菌的形態與染色特性，快速指導經驗性抗生素的選擇，是臨床感染症診斷流程中不可或缺的一環。

C. 抑制菌體細胞壁合成之抗生素，容易造成革蘭氏陽性細菌對脫色液之敏感性增加

此敘述正確。抑制細胞壁合成的抗生素，例如 penicillin（青黴素）、cephalosporin（頭孢菌素）、vancomycin（萬古黴素）等，會破壞肽聚醣層的交聯結構。當革蘭氏陽性細菌的厚肽聚醣層因藥物作用而變得疏鬆時，細菌保留結晶紫-碘複合物（crystal violet-iodine complex）的能力下降，對脫色液的敏感性因此增加，可能導致染色呈現假陰性結果。

D. 嗜中性球之細胞核經革蘭氏染色後，常呈粉紅色

此敘述正確。嗜中性球（neutrophil）的細胞核在革蘭氏染色過程中，會被脫色液脫去結晶紫，隨後被複染劑沙黃素（safranin）染成粉紅色或紅色。這同時也是判斷革蘭氏染色品質的內部對照指標之一：如果嗜中性球核呈現紅色或粉紅色而非藍紫色，表示脫色步驟處理得當。

答案解析

本題正確答案為 B（最不適當的敘述）。革蘭氏染色法不但適用於臨床檢體的直接染色鏡檢，而且這正是它在臨床微生物診斷上最重要的應用之一。直接塗片可在短時間內提供致病菌的初步形態與染色資訊，是感染症快速診斷的關鍵步驟。其他三個選項（老化培養改變染色性、細胞壁抗生素增加脫色敏感性、嗜中性球核染粉紅色）都是正確的敘述。

核心知識點

  • 革蘭氏染色直接塗片（direct smear）廣泛適用於各類臨床檢體，是最基本的快速鏡檢方法
  • 老化培養菌株的肽聚醣層劣化，會出現革蘭氏不定性（gram-variable），建議用 12-18 小時年輕培養物
  • 抑制細胞壁合成的抗生素（penicillin、cephalosporin、vancomycin）會破壞肽聚醣交聯，增加革蘭氏陽性菌對脫色液的敏感性
  • 嗜中性球細胞核經革蘭氏染色後被沙黃素（safranin）染成粉紅色，可作為染色品質的內部對照
  • 革蘭氏染色四步驟：結晶紫初染 → 碘液媒染 → 酒精脫色 → 沙黃素複染

參考資料

了解本站架構