下列何種鹼性磷酸酶(ALP)同功酶最耐熱?
詳細解析
本題觀念
鹼性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)在人體有多種同功酶,主要來自胎盤、肝臟、小腸及骨骼等不同組織。各型 ALP 在結構與物理化學性質上有所不同,其中耐熱性是臨床實驗室用來區分不同來源 ALP 的重要依據。加熱處理後觀察酵素殘留活性,可據此判定主要的同功酶來源。
選項分析
A:胎盤型 ALP 是所有同功酶中最耐熱的,可在 65°C 加熱 30 分鐘仍保持活性,在鎂離子存在下甚至能耐受 70°C 達 30 分鐘。加熱後殘留活性達總 ALP 的 90-100% 時,即判定為胎盤來源。Regan 同功酶(一種腫瘤相關的胎盤型 ALP)也具有相同的耐熱特性。
B:肝臟型 ALP 耐熱性中等,在 56°C 加熱 30 分鐘即喪失大部分活性,遠不及胎盤型可耐受 65-70°C 的能力。
C:小腸型 ALP 雖比肝臟型和骨骼型稍耐熱,但仍遠不及胎盤型。小腸型的另一特徵是對 L-苯丙胺酸(L-phenylalanine)敏感,可被其抑制。
D:骨骼型 ALP 是所有同功酶中最不耐熱的,在較低溫度即失去活性。骨骼型與肝臟型由同一基因(ALPL)編碼,差異在於轉錄後糖基化修飾程度不同,導致耐熱性有差異。
答案解析
本題答案為 A。ALP 同功酶的耐熱排序為:胎盤型 > 小腸型 > 肝臟型 > 骨骼型。臨床實驗室利用胎盤型 ALP 獨特的耐熱性進行同功酶鑑定,在 60°C 加熱條件下可同時區分胎盤型(保持高活性)、小腸型(可被 L-苯丙胺酸抑制)及肝臟型(在此溫度下失活)。
核心知識點
ALP 同功酶鑑別以加熱和化學抑制為主要方法。胎盤型 ALP 可耐受 65°C 以上高溫而不失活,是最穩定的同功酶,臨床上於懷孕後期可見升高。骨骼型最不耐熱,在成長期或骨骼疾病時升高。記住耐熱排序(胎盤 > 小腸 > 肝臟 > 骨骼)與各型特異鑑別法,是解這類考題的關鍵。
參考資料
- PubMed: Quantitative fractionation of alkaline phosphatase isoenzymes. https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/14304254/
- Auckland DHB Test Guide: Alkaline Phosphatase Isoenzymes. https://testguide.adhb.govt.nz/eguidemob/?gm=1258&gs=3
- Lab Pedia: Alkaline Phosphatase (ALP). https://labpedia.net/alkaline-phosphatase-alp/
- NCBI PMC: Alkaline Phosphatase review. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3933536/