115年:(醫檢)免疫病毒(2)
有關競爭型immunoassay 的特點,以下何者正確?
A固定量的標定抗原,與未標定的抗原樣本,同時競爭固定結合位點的抗體
B藉由補體活化作用,提供血清中和反應(neutralization)
C抗體結合在細胞表面受體,產生致敏反應(sensitization)
D酵素標定的抗體,進行聚合酶連鎖反應(polymerase chain reaction)
詳細解析
本題觀念
競爭型免疫分析(competitive immunoassay)的核心,是讓樣本中的未標定抗原與固定量的標定抗原,爭奪有限數量的抗體結合位點。標定抗原與抗體結合後產生可量測訊號;樣本抗原越多,能留下來與抗體結合的標定抗原越少,訊號通常越弱。因此這類方法的訊號與待測抗原濃度呈反向關係,和夾心型免疫分析常見的正向關係不同。
選項分析
- A 正確。 固定量的標定抗原和樣本中的未標定抗原,同時存在於反應系統中,會競爭有限的抗體結合位點。當樣本抗原濃度上升,標定抗原被抗體捕捉的比例下降,最後由標定物所產生的訊號也隨之下降。這正是競爭型免疫分析的判讀基礎。
- B 錯誤。 補體活化與血清中和反應屬於免疫防禦或免疫效應機制,重點在補體、抗體與病原體或毒素之間的作用;它不是競爭型免疫分析中標定抗原和未標定抗原競爭抗體位點的反應配置。
- C 錯誤。 抗體與細胞表面受體結合並造成致敏,描述的是細胞反應或過敏相關的免疫現象。競爭型免疫分析則是在體外利用抗原、標定物與抗體的有限結合關係來定量,兩者的目的與反應場所不同。
- D 錯誤。 競爭型免疫分析可以使用酵素作為標定物,並透過酵素反應產生顏色或其他訊號,但聚合酶連鎖反應(polymerase chain reaction, PCR)是核酸擴增技術,不是此免疫分析格式的主要反應。把酵素標定與 PCR 放在一起,混淆了訊號產生方式與核酸檢測方法。
答案解析
本題答案為 A。可把反應想成有限座位的競爭:抗體提供有限的結合位點,標定抗原與樣本抗原爭坐這些位置。標定抗原所占的比例越高,量測到的訊號越強;樣本中未標定抗原越多,標定抗原被排擠得越多,訊號便越低。這種「待測物增加、訊號減少」的反向校正曲線,是辨認競爭型免疫分析的重要線索。實際檢測可依均相或異相設計、標定物種類與訊號讀取方式而有差異,但不會改變競爭有限抗體位點的基本概念。
核心知識點
- 競爭型格式:固定量標定抗原+樣本未標定抗原+有限量抗體。
- 定量方向:樣本抗原濃度越高,抗體所結合的標定抗原越少,訊號越低。
- 夾心型格式通常是待測抗原越多、訊號越強;不要把兩種格式的曲線方向混淆。
- 酵素、螢光或放射性物質是標定與訊號讀取的選擇,不等於檢測原理本身;PCR則屬於核酸擴增方法。