114年:(醫檢)生化(1)
關於雙脲法(biuret)檢測方法之敘述,下列何者錯誤?
A需要銅離子與鹼性環境
B常用的蛋白質檢測方法
C可與三胜肽(tri-peptide)反應良好
D透過銅離子與游離胺基酸形成複合物(multivalent complex)
詳細解析
本題觀念
本題聚焦Biuret試驗(雙脲法,biuret method)在蛋白質定量中的化學原理、反應對象及試劑條件。核心在於理解Biuret試劑中Cu^2+在鹼性環境下與肽鍵(peptide bond)配位產生顏色反應的專一性與敏感度。
選項分析
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選項A:需要銅離子與鹼性環境。
Biuret試劑由CuSO₄與NaOH(及tartrate緩衝劑)組成,Cu^2+在鹼性條件下與肽鍵配位,生成紫色配合物,顏色強度與肽鍵數量正比。此敘述正確。 (en.wikipedia.org) -
選項B:常用的蛋白質檢測方法。
Biuret法為經典且廣泛用於臨床及實驗室的總蛋白定量方法,許多自動化生化分析儀的總蛋白定量即基於此反應。此敘述正確。 (chemistry.mlsascp.com) -
選項C:可與三胜肽(tri-peptide)反應良好。
文獻明確指出:單胺基酸(amino acid)及二胜肽不產生Biuret反應,須至少三胜肽才有兩個以上肽鍵可以與Cu^2+形成
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