112年:(醫檢)生化(1)

使用 biuret method 定量蛋白質時,下列敘述何者正確?

A通常利用酸性環境進行此反應
B試劑中含 biuret 可促進呈色
C反應後產生黃色複合物可供偵測
D試劑中含 Cu2+ 可與胜肽鍵作用

詳細解析

本題觀念:

Biuret法藉由Cu²⁺在強鹼環境中與蛋白質肽鍵配位,生成紫色配合物,其吸光度與肽鍵數量成正比,用於蛋白質定量。

選項分析

  • 選項A 通常利用酸性環境進行此反應
    Biuret反應需在鹼性介質(NaOH或KOH)中進行,以去質子化肽鍵並促使Cu²⁺配位,並非酸性環境(vedantu.com)。

  • 選項B 試劑中含 biuret 可促進呈色
    雖名為“Biuret reagent”,實際組成為CuSO₄、強鹼及穩定劑(sodium potassium tartrate),並不含biuret分子;試劑名稱源自與biuret分子相似的肽鍵反應,並非添加biuret本身(chemeurope.com)。

  • 選項C 反應後產生黃色複合物可供偵測
    Biuret反應生成紫色至紫紅色配合物(吸收波長約540–560 nm),非黃色([biologymanual.commons.gc.cuny.edu](https://biology

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