下列何種細菌培養在厭氧血液培養基（ anaerobic blood agar ）上時，會出現有雙圈溶血現象？

本題觀念：

本題探討厭氧血液培養基（anaerobic blood agar）上Clostridium屬菌的溶血型態，重點在於「雙圈溶血（double zone hemolysis）」的特徵。Clostridium perfringens可同時分泌兩種hemolysin：α toxin（phospholipase C／lecithinase，造成外圈不完全溶血）及θ toxin（perfringolysin O，造成內圈完全溶血），在血平皿上呈現內外二環狀溶血區。

選項分析

• 選項A Clostridioides difficile
  C. difficile在Brucella或Trypticase soy含5%羊血的血平皿上，48小時生長後菌落不造成溶血，維持血液培養基完整紅血球；雖具紫外光螢光但不溶血(tgw1916.net)。

• 選項B Clostridium tetani
  C. tetani菌落扁平或灘狀，部分菌株示單一β溶血，無法形成α+θ雙重溶血區；缺乏lecithinase引起的不完全溶血，因此不具雙圈型態(science.umd.edu)。

• 選項C Clostridium perfringens
  臨床與實驗室常見的厭氧菌，經典雙圈溶血是其鑑別金標，內圈由θ toxin形成完全透明的β溶血區，外圈由α toxin形成綠褐色的不完全α溶血區；在CDC Anaerobic Blood Agar上即可觀察到該現象(anaerobesystems.com)。

• 選項D Clostridium botulinum
  C. botulinum於血平皿產生大而不規則菌落，少數菌株可見輕微β溶血，但文獻未報導其具雙圈溶血；主要鑑別靠毒素偵測，而非血平皿雙圈溶血(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。

答案解析

Clostridium perfringens在anaerobic blood agar上因同時分泌α和θ兩種hemolysin，可形成內圈完全溶血與外圈不完全溶血的雙圈溶血現象，此為其鑑別性特徵。其他選項菌種不具此雙重溶血型態，故正確答案為C。

核心知識點

1. 溶血型態
   • α hemolysis：不完全，綠褐色
   • β hemolysis：完全，透明
   • γ hemolysis：無溶血
   • Double zone/target hemolysis：內β＋外α
2. Clostridium perfringens毒素
   • α toxin（phospholipase C/lecithinase）：外圈α
   • θ toxin（perfringolysin O）：內圈β
3. Clostridium屬常見菌比較
   • C. tetani：terminal spore，非雙圈
   • C. botulinum：subterminal spore，輕微或無溶血
   • C. difficile：non-hemolytic

臨床重要性

迅速辨識C. perfringens對於氣性壞疽與食物中毒病例極為關鍵。利用雙圈溶血特徵，可在初步培養階段即提供強烈診斷指引，加速毒素檢測與臨床處置。