114年:(醫檢)免疫病毒(2)
有關流式細胞儀的敘述,下列何者錯誤?
A染單核球細胞須注意 Fc receptor 問題
B可以做嗜中性白血球的功能性分析
C細胞存活率檢測需要酒精固定再染色
D前方散射光可以反應出細胞大小
詳細解析
本題觀念:
流式細胞儀(flow cytometry)的操作原理包含光散射(light scatter)與螢光偵測(fluorescence detection)兩大面向,前者可用來快速區分細胞大小及內在顆粒度,後者結合標記抗體或功能性探針,可做細胞表面抗原定量、凋亡/存活分析及白血球功能檢測。
選項分析
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選項A 染單核球細胞須注意 Fc receptor 問題
單核球、巨噬細胞等免疫細胞表面高度表現 Fcγ 受體,若不先行封阻(Fc block),抗體的 Fc 端易非專一性黏附造成背景升高。因此染色前須以人血清或純化 IgG 等試劑封阻 Fc 受體,才能保證染色特異性。(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov) -
選項B 可以做嗜中性白血球的功能性分析
流式細胞儀可用探針如 DCFH-DA、DHR-123 檢測嗜中性球氧化爆發(oxidative burst)、以螢光標定細菌或顆粒評估吞噬功能,並可同時分析凋亡、細胞表面標誌等多重參數。此法已廣泛用於原發性免疫缺陷(如 CGD)及感染性疾病的診斷。([pubmed.ncbi.nlm.nih.gov](https://pubmed.ncbi.nlm.nih.g
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