承上題【運用reverse hybridization的核酸檢驗套組進行C型肝炎病毒的基因分型，其檢驗步驟由前至後順序，何者正確？①特異性引子進行PCR擴增標的cDNA　②擴增產物與基因型特異的寡核苷酸探針陣列進行雜交反應③RNA反轉錄成互補DNA　④檢體製備　⑤肉眼判讀Ｃ型肝炎病毒基因分型　⑥進行呈色反應】，HCV基因分型判讀的型態表如下列圖一，病人檢體檢測Ｃ型肝炎病毒基因分型結果如下列圖二。本檢體之檢測結果為何？

本題觀念

C型肝炎病毒（HCV）基因分型常用reverse hybridization（反向雜交）原理的line‐probe assay（LiPA）或Versant HCV Genotype 2.0試劑盒，將臨床檢體中萃取的HCV RNA經reverse transcription、PCR擴增後，使標記的擴增片段與膜上固定的基因型特異探針雜交，再經顯色反應顯示不同探針位置的條帶，據此判讀HCV基因型。

影像分析

– 圖一為HCV基因型分型型態表，每一行代表一個基因型（GT1～GT6），每一列代表對應的探針位置（1至8號探針）。“＋”表示該基因型一定會出現的條帶，“±”表示可能出現弱條帶，“－”表示該位置不應出現條帶。
– 圖二最右側為病人檢體（P1）之分型結果，條帶出現在探針3和探針7位置，其它探針均無顯色條帶。依圖一對照，第3、7號探針同時呈現增色的基因型為GT3。

選項分析

• 選項A HCV基因型1
  圖一中GT1應該在探針1、2兩處出現明顯條帶（GT1a/1b子型探針更細分），而病人條帶僅見於3、7號探針，不符GT1的型態，因此排除GT1。
• 選項B HCV基因型3
  GT3對應型態表顯示探針3與7皆為“＋”，其他探針應不呈現顯色。病人檢體正好在3、7號兩處呈現條帶，符合GT3分型特徵，為正

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