113年:(醫檢)檢驗(1)

下列何種方法可以運用已知圖譜比對,來鑑定結核分枝桿菌?

APCR-RFLP
BPCR-SSCP
CPCR-ribotyping
Dmultiplex-PCR

詳細解析

本題觀念:

分枝桿菌複合體(MTBC)的分型(genotyping)多半仰賴DNA指紋圖譜(fingerprint)比對,此種技術可用於流行病學追蹤與菌株同源性分析。RFLP(restriction fragment–length polymorphism)利用限制性酶切製備多型性片段,經Southern blot或PCR放大後,生成菌株特異性條帶圖譜,可與已建立的圖譜資料庫比對,識別並歸類M. tuberculosis株。

選項分析

  • 選項A PCR-RFLP
    PCR-RFLP指先以PCR放大目標DNA區段(如IS6110或其他重複序列),再以限制性酶消化,再分離並比對片段長度。IS6110-RFLP乃公認的金標準,能產生多條特定條帶,並可與國家或CDC指紋資料庫中的範本圖譜進行比對,適用於鑑定和追蹤個別M. tuberculosis株與群集事件(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。

  • 選項B PCR-SSCP
    PCR-SSCP(single-strand conformation polymorphism)以PCR產物單鍊DNA的構象差異於膠上遷移率不同來偵測單核甘酸多態性,只能診斷小片段內單一或少數

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