112年:(醫檢)檢驗(1)
PCR是分子檢驗常用的核酸放大技術，關於延伸技術的敘述，下列何者最正確？
Anested PCR可提高 PCR 反應的 specificity和 sensitivity
B進行 semi-nested PCR 時， 反應中一共有 4 個 primers
CPCR之 tailed primer method，可增加 可增加 PCR 的 specificity，但不會增加 sensitivity
Dgap-PCR 適合用來偵測核酸點突變
詳細解析
本題觀念：
聚合酶連鎖反應（PCR）的延伸技術（modification）包括巢式PCR（nested PCR）、半巢式（semi-nested PCR）、tailed primer PCR與gap-PCR等。這些技術皆透過不同的引子設計與實驗流程，達到提升放大特異性（specificity）、靈敏度（sensitivity）、或是能偵測特定結構變異（如大片段缺失）的目的。
選項分析
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選項A
「nested PCR可提高 PCR 反應的 specificity 和 sensitivity」
巢式PCR利用兩對引子，先以外層引子進行一輪放大，再以內層（nested）引子對第一輪產物中更特定區段放大。此設計大幅降低非特異性產物的累積、並利用二次放大提高對低量模板的檢出率，因此同時提升特異性與靈敏度 (basicmedicalkey.com)。 -
選項B
「進行 semi-nested PCR 時，反應中一共有 4 個 primers」
半巢式PCR（semi-nested）在第二輪PCR中，只有一支外層引子被替換成內層引子，另一支則沿用第一輪引子，因此全
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