112年:(醫檢)檢驗(2)

關於 thermostable polymerase 的特性與應用,下列敘述何者最不適當?

ATth polymerase適用於 one step real-time RT-PCR
BTth polymerase具有反轉錄酶( reverse transcriptase )的活性
CTag polymerase的 stoffel fragment 具有 3' 端至 5' 端 exonuclease 活性
DTag polymerase的 stoffel fragment 適合擴增高 GC 比的片段

詳細解析

本題觀念:

針對 thermostable DNA polymerase(耐高溫聚合酶)的來源、酵素活性(聚合酶活性、反轉錄酶活性、外切酶活性)以及在不同 PCR 應用(one-step real-time RT-PCR、探針實時定量 PCR、GC-rich 片段擴增)上的優劣比較。

選項分析

  • 選項A Tth polymerase 適用於 one step real-time RT-PCR
    Tth DNA polymerase(源自 Thermus thermophilus)在 Mn²⁺ 存在下具備 reverse transcriptase 活性,市售已推出以此酵素為基礎的 one-step real-time RT-PCR Master Mix(例如 RNA-direct™ Realtime PCR Master Mix),可同管完成 reverse transcription 與 PCR 反應 (asone-int.com)。

  • 選項B Tth polymerase 具有反轉錄酶(reverse transcriptase)活性
    Tth 聚合酶在 Mn

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