下列何種抗體的檢測，需將病人與正常混合血漿（ pooled normal plasma ）進行1：1混合後，置於37℃孵育2小時再檢驗？

本題觀念：

本題考查的是凝血功能異常的鑑別診斷，特別是**混合試驗（Mixing Study）在偵測時間依賴型抑制劑（Time-dependent inhibitor）**中的應用。

選項分析

• A. 第八凝血因子抗體（factor VIII inhibitor）：正確。

  • 原理：第八凝血因子（Factor VIII）的抑制劑（通常是 IgG4 抗體）具有時間依賴性（time-dependent）和溫度依賴性的特質。這意味著抗體需要時間與溫度（37°C）才能與 FVIII 充分結合並發揮中和作用。
  • 檢驗特徵：如果僅做立即混合（Immediate mix），APTT 可能會因為正常血漿中的 FVIII 尚未被中和而暫時糾正（看似正常）。因此，必須進行37°C 孵育 2 小時的延遲混合試驗。若孵育後的混合血漿 APTT 顯著延長（無法糾正），則強烈提示 FVIII 抑制劑的存在。這也是定量 FVIII 抑制劑的 Bethesda Assay 的基礎步驟。

• B. anti-β2 GP1 antibody：錯誤。

  • 這是抗磷脂症候群（APS）的血清學標記之一。
  • 檢測方法：通常使用固相免疫分析法（如 ELISA 或化學冷光免疫分析），直接偵測血清中的抗體濃度，而非使用凝血時間混合試驗。

• C. anticardiolipin antibody：錯誤。

  • 同樣是抗磷脂症候群（APS）的標記。
  • 檢測方法：與 anti-β2 GP1 一樣，主要透過 ELISA 進行免疫學檢測。雖然它與狼瘡抗凝血素有關，但其本身的檢測不涉及血漿混合孵育。

• D. 狼瘡抗凝血素（lupus anticoagulant, LA）：錯誤。

  • 原理：LA 是一種干擾磷脂質依賴性凝血測試的非特異性抑制劑。
  • 檢測特徵：LA 的作用通常是**立即性（immediate）**的。在混合試驗中，立即混合即可見到 APTT 無法糾正（Rosner index 高）。雖然少數 LA 可能表現出時間依賴性，但在標準檢驗流程中，「37°C 孵育 2 小時」主要是為了排除或確認 FVIII 抑制劑（因為 FVIII 抑制劑若不做孵育會漏診，而 LA 通常在立即混合就能發現）。此外，長時間孵育可能導致不含抑制劑的檢體因凝血因子（如 FVIII, V）自然衰退而產生假陽性，並非 LA 的特異性確診條件。

答案解析

本題描述的檢驗步驟「與正常混合血漿 1:1 混合後，置於 37°C 孵育 2 小時」，是專門針對**時間依賴型抑制劑（Time-dependent inhibitor）**的標準篩檢與確認步驟。在臨床凝血醫學中，最具代表性且必須此步驟才能檢出的即為 Factor VIII inhibitor（常見於後天性 A 型血友病或 A 型血友病患者產生抗體）。

因此，正確答案為 (A) 第八凝血因子抗體。

核心知識點

1. APTT Mixing Study 判讀原則：

   • 立即糾正 (Corrects immediately)：提示凝血因子缺乏（Factor deficiency）。
   • 立即不糾正 (No correction)：提示存在立即反應型抑制劑（如 Lupus anticoagulant, Heparin）。
   • 立即糾正，但孵育後延長 (Correction immediate, prolongation after incubation)：提示時間依賴型抑制劑，最典型為 Anti-Factor VIII。

2. Bethesda Assay：

   • 用於定量凝血因子抑制劑（主要是 FVIII）的標準方法。
   • 定義：1 Bethesda Unit (BU) 為在 37°C 孵育 2 小時後，能中和 50% FVIII 活性所需的抑制劑量。

參考資料

1. Practical Haemostasis - Inhibitor Assays. (2025). "Factor VIII inhibitors are time dependent... hence the requirement for an incubation step at 37°C for 120 minutes."
2. Cleveland Clinic Laboratories - Mixing Study, Incubated APTT. "In cases with a delayed type inhibitor (e.g., Factor VIII inhibitor), the APTT Immediate Mix will correct... however, the APTT Incubated Mix will be prolonged."
3. NIH - Acquired inhibitors of clotting factors. "The reaction of FVIII inhibitors is time- and temperature-dependent; they react slowly to inactivate FVIII and are most effective at 37°C."