115年:(醫檢)微生(1)
下列何種培養基可以用來分離及鑑別大腸桿菌O157:H7?
Aeosin methylene blue (EMB)培養基
BHektoen enteric (HE)培養基
Ccefsulodin-irgasan-novobiocin (CIN)培養基
DMacConkey-sorbitol (MAC-SOR)培養基
詳細解析
本題觀念:
本題考查的是 腸道出血性大腸桿菌 (EHEC) O157:H7 血清型 的特殊生化特性及其專用選擇性培養基。 一般的大腸桿菌 (E. coli) 能夠發酵山梨醇 (Sorbitol),但 E. coli O157:H7 具有一個獨特的生化特徵:它無法發酵山梨醇 (Sorbitol non-fermenting) 或發酵極慢。利用此特性,實驗室設計了特殊的培養基將其與一般大腸桿菌區分開來。
選項分析
- A. eosin methylene blue (EMB)培養基:
- 錯誤。EMB 培養基主要用於分離革蘭氏陰性腸道桿菌,特別是區分乳糖發酵菌。一般 E. coli (包含 O157:H7) 在 EMB 上因快速發酵乳糖,會呈現深紫色菌落並帶有明顯的綠色金屬光澤 (green metallic sheen)。因此,EMB 無法將 O157:H7 與其他非病原性的 E. coli 區分開來。
- B. Hektoen enteric (HE)培養基:
- 錯誤。HE 培養基主要用於分離 沙門氏菌 (Salmonella) 和 志賀氏菌 (Shigella)。它含有較高濃度的膽鹽以抑制一般大腸桿菌生長 (雖然 E. coli 仍可能生長,但會因發酵乳糖/蔗糖/水楊苷而呈現橘黃色)。它不是用來篩檢 O157:H7 的首選。
- C. cefsulodin-irgasan-novobiocin (CIN)培養基:
- 錯誤。CIN 培養基是 耶爾森氏菌 (Yersinia enterocolitica) 的專用選擇性培養基。Yersinia 會發酵甘露醇 (Mannitol),在 CIN 上呈現典型的「牛眼狀」(bull's-eye) 菌落(深紅色中心,透明邊緣)。
- D. MacConkey-sorbitol (MAC-SOR)培養基:
- 正確。這是標準 MacConkey 培養基的變體,將原本的乳糖 (Lactose) 替換為 山梨醇 (Sorbitol)。
- 原理:絕大多數的 E. coli (正常菌叢) 能發酵山梨醇,產酸使菌落呈現粉紅色;但 E. coli O157:H7 不發酵山梨醇,因此菌落呈現無色 (colorless)。這種顏色差異使其能從大量糞便檢體中被快速篩檢出來。
答案解析
正確答案為 D。 MacConkey-sorbitol Agar (SMAC) 是目前臨床微生物實驗室篩檢 E. coli O157:H7 的標準初篩培養基。其利用該菌株「不發酵山梨醇」的特性,形成無色菌落,與其他呈現粉紅色的正常大腸桿菌形成對比。若要進一步提高特異性,有時會加入 Cefixime 和 Tellurite (即 CT-SMAC),以抑制其他雜菌。
核心知識點
考生應掌握 E. coli O157:H7 的關鍵鑑別特徵 (與一般 E. coli 的差異):
- 培養基特徵:在 SMAC (Sorbitol MacConkey) 培養基上為 Sorbitol (-),呈現無色菌落。
- 生化試驗:
- MUG 測試:O157:H7 通常為 MUG 陰性 (一般 E. coli 為陽性,能在 UV 下產生螢光)。
- 乳糖發酵:O157:H7 仍然會發酵乳糖 (Lactose +),因此在一般 MacConkey 上與正常 E. coli 一樣是粉紅色,無法區分。
- 致病機制:屬於 EHEC,產生 Shiga toxin (Stx1, Stx2),可引起出血性結腸炎及溶血性尿毒症候群 (HUS)。
參考資料
- MacConkey Sorbitol Agar (Sorbitol Agar): Principle And Interpretation. (Exodocientifica).
- Sorbitol MacConkey Agar- Composition, Principle, Preparation, Results, Uses. (Microbe Notes).
- Hektoen Enteric (HE) Agar: Composition, Uses. (Microbe Online).
- CIN Agar - for Yersinia and Aeromonas. (Hardy Diagnostics).