114年:藥學二(第2次)

下列何者最不可能是層析時造成波峰不對稱性的原因?

A載入過多樣品到層析管內
B分析物發生降解
C分析物不易於管柱中滯留
D層析系統中的無效空間( dead volume )不足夠

詳細解析

本題觀念:

本題考查的是層析圖譜波峰不對稱性(Peak Asymmetry)的成因。理想的層析波峰應呈現高斯分佈(Gaussian distribution),但在實際操作中,波峰常會出現拖尾(Tailing)或前延(Fronting)。了解造成這些變形的原因對於層析方法的開發與除錯至關重要。

主要影響波峰對稱性的因素包括:

  1. 樣品負載量(Sample Loading):過載會導致不對稱。
  2. 化學效應:如分析物降解、次級交互作用(如與矽醇基作用)。
  3. 物理/系統效應:如管柱填充不均、系統無效體積(Dead Volume)。
  4. 滯留因子(Retention Factor, k′k'):滯留過弱的波峰容易受系統效應影響。

選項分析

  • A. 載入過多樣品到層析管內 (Loading too much sample):
    • 會造成不對稱。
    • 這稱為管柱過載(Column Overloading)。當樣品濃度或總量超過固定相的負荷能力時,會發生「質量過載」(Mass Overload)或「體積過載」(Volume Overload)。
    • 這通常會導致波峰出現前延(Fronting,鯊魚鰭狀),因為高濃度部分的移動速

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