109年:營養生理生化(2)
有關蛋白質純化的親和性層析法(affinity chromatography ),下列敘述何者正確?
A以分子量大小來分離純化
B以專一性結合來分離純化
C以帶電荷量的不同來分離純化
D以改變蛋白質溶解度強弱來分離純化
詳細解析
本題觀念:
本題考查的是**蛋白質純化技術(Protein Purification)中的層析法(Chromatography)**原理。不同的層析法依據蛋白質不同的物理化學性質(如分子量、電荷、專一性結合能力等)進行分離。營養師需具備生化實驗基本知識,了解如何從複雜混合物中提取特定蛋白質。
選項分析
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A. 以分子量大小來分離純化:錯誤
- 這是膠體過濾層析法(Gel Filtration Chromatography),又稱為分子篩層析(Molecular Sieve Chromatography)或大小排阻層析(Size Exclusion Chromatography, SEC)的原理。
- 其利用多孔珠子(beads)作為固定相,大分子無法進入珠子孔隙,因此走得快、最先流出;小分子會進入孔隙繞行,路徑較長,因此走得慢、最後流出。
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B. 以專一性結合來分離純化:正確
- 這是**親和性層析法(Affinity Chromatography)**的定義。
- 原理是利用蛋白質與特定配體(Ligand)之間具有**高度專一性(Specificity)**的生物化學結合力。例如:抗原與抗體、酵素與受質(或抑制劑)、荷爾蒙與受體、生物素(Biotin)與親和素(Avi
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