106年:營養生理生化(2)

Phenylisothiocyanate 是由 Pehr Edman 研發成功的一種試劑,常用於鑑定下列何者?

A蛋白質的 C-端胺基酸
B蛋白質的肽鍵數目
C蛋白質的雙硫鍵
D蛋白質的 N-端胺基酸

詳細解析

本題觀念:

Edman 降解法(Edman degradation)是由瑞典科學家 Pehr Edman 於 1950 年代開發的蛋白質定序技術,使用苯基異硫氰酸酯(phenylisothiocyanate, PITC)為試劑,專門用於**逐步鑑定蛋白質或胜肽的 N-端胺基酸(N-terminal amino acid)**序列。

選項分析

(A) 蛋白質的 C-端胺基酸 C-端(C-terminus)鑑定使用不同方法,如羧胜肽酶(carboxypeptidase)酵素降解法或化學標記法(如 hydrazine 降解)。PITC 作用於游離的 α\alpha-胺基(NH2-\text{NH}_2),而 C-端為羧基(COOH-\text{COOH}),PITC 不與其反應。❌

(B) 蛋白質的肽鍵數目 肽鍵(peptide bond)數目等於胺基酸數減 1,可由胺基酸總數推算,無需 PITC 試劑。❌

(C) 蛋白質的雙硫鍵 雙硫鍵(disulfide bond, SS-\text{S}-\text{S}-)的檢測與還原,使用 DTT(dithiothreitol)、β-mercaptoethanol 等還原劑,或 Ellman 試劑(DTNB)。與 PITC 無關。❌

(D) 蛋白質的 N-端胺基酸 PITC 在弱鹼性條件下與

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