106年:營養食安(2)
使用 L5178Y K +/-鼷鼠淋巴瘤細胞株進行體外哺乳類細胞基因毒性分析,如要測定致突變數量(numbers of mutants )及細胞複製效率( cloning efficiency )時,應在試驗物質作用後,於適當時間將細胞分別培養在含及不含下列何種化合物之培養液中?
A嘌呤類似物
B嘧啶類似物
C肝臟抽出液( S9)
D3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT)
詳細解析
本題觀念:
L5178Y TK+/– 鼷鼠淋巴瘤細胞基因突變分析(mouse lymphoma assay, MLA)是利用**胸腺嘧啶激酶(thymidine kinase, TK)基因座的正向突變(forward mutation),偵測受試物質的基因毒性。試驗核心在於:突變細胞(TK–/–)能在含嘧啶類似物(pyrimidine analogue)三氟胸腺嘧啶核苷(trifluorothymidine, TFT)**的培養液中存活並增殖,而正常細胞則被抑制。本題考核選擇突變細胞株所使用的化合物類別。
選項分析
(A) 嘌呤類似物(purine analogue) → 錯誤。 嘌呤類似物(如 6-thioguanine)用於 HPRT(hypoxanthine phosphoribosyltransferase)基因突變試驗,而非 L5178Y TK 分析。L5178Y MLA 針對的是嘧啶代謝路徑(TK 酵素),因此選擇試劑必須是嘧啶類似物。
(B) 嘧啶類似物(pyrimidine analogue) → 正確。 L5178Y TK+/– 分析使用的選擇試劑是三氟胸腺嘧啶核苷(trifluorothymidine, TFT),即一種嘧啶(pyrimidine)的衍生物類似物。正常細胞具有 TK 酵素
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