114年:(醫檢)檢驗(1)

關於chemical cleavage of mismatch duplexes(CCM)技術,下列敘述何者最正確?

A用來偵測基因內多個鹼基突變
B反應中之hydroxylamine修飾配對錯誤鹼基中的胸腺嘧啶(thymine)
C反應中的piperidine針對修飾後的胞嘧啶(cytosine)及胸腺嘧啶(thymine)位置進行切割
D僅適用於短的(小於1 kb)DNA片段分析

詳細解析

本題觀念:

本題探討Chemical Cleavage of Mismatch duplexes(CCM)技術在DNA突變篩檢中的應用原理與限制,包括利用化學試劑對異源雙股DNA中錯配的碱基進行特異修飾,並以piperidine切割修飾後之部位,再經電泳比對片段長度以定位突變點。

選項分析

  • 選項A
    「用來偵測基因內多個鹼基突變」
    CCM的主要用途在於掃描一段DNA(最長可達約2 kb)中是否存在錯配,包括單點突變、插入或刪除,並可同時定位多個突變位置,但技術核心在於對錯配碱基的特異化學切割,並非專指「多個鹼基突變」模式,比較通常稱為「掃描」或「定位」突變,選項敘述易造成誤導,過於籠統。 (pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)

  • 選項B
    「反應中之hydroxylamine修飾配對錯誤鹼基中的胸腺嘧啶(thymine)」
    實際上,hydroxylamine專一性修飾未配對(錯配)的胞嘧啶(C),而非胸腺嘧啶(T)。T錯配則需藉由osmium tetroxide或potassium permanganate修飾。故此選項錯誤。 ([pubmed.ncbi.nlm.nih.gov](https:

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