114年:(醫檢)檢驗(1)
探針雜合反應廣泛運用在核酸分子檢測，下列敘述何者最不適當？
A探針的長度可決定偵測的特異性
B雜合反應溶液的鹽類濃度越高，偵測特異性越高
C進行南方墨點法時，使用RNA探針比DNA探針偵測靈敏度更高
Dpeptide nucleic acid（PNA）探針的骨架減少了負電荷，因此結合至標的基因會更有效率
詳細解析
本題觀念：
探針雜合反應（nucleic acid hybridization）應用於DNA/RNA檢測時，需透過調整探針設計（長度、序列、標記）、雜合條件（溫度、鹽濃度、去污劑）來平衡特異性（stringency）與靈敏度。
選項分析
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選項A
探針長度影響雜合特異性。較長探針具較高Tm，能更精準鑑別單一鹼基差異；較短探針雖特異性更高，但靈敏度下降。實務上，探針長度為設計時的重要參數(aatbio.com)。 -
選項B
雜合反應中高鹽緩衝液（高 ionic strength）會屏蔽鹼基負電荷、穩定所有duplex，使mismatch也易被維持，降低stringency；反之，低鹽條件提高stringency，僅允許完全互補序列結合。故「鹽濃度越高，特異性越高」錯誤([aatbio.com](https://www.aatbio.com/resources/faq-frequently-asked-questions/What-
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