114年:(醫檢)檢驗(2)

關於核酸的敘述,下列何者最不適當?

A可以用鹼性溶解法( alkaline lysis methods )處理Gram-negative bacteria 來將核酸釋出
B從檢體中執行核酸萃取,只能萃取出 DNA或是RNA的其中一種
C萃取出的 RNA較不穩定,最好是保存在 -70℃,並儘快執行後續分析
D可以使用紫外分光光度計,測定 260 nm吸光度並換算為核酸量

詳細解析

本題觀念:

本題聚焦於核酸(nucleic acid)在分子生物學實驗中之萃取(extraction)、儲存(storage)及定量(quantification)技術。涵蓋細胞裂解方法(如 alkaline lysis)、同時或單獨萃取 DNA/RNA 的策略、RNA 穩定性與儲存條件,以及利用光譜法(UV spectrophotometry)於 260 nm 測量核酸濃度的原理。

選項分析

  • 選項A
    「可以用鹼性溶解法(alkaline lysis methods)處理 Gram-negative bacteria 來將核酸釋出」
    Alkaline lysis 最常用於細菌質體 DNA 的萃取,亦可釋放染色體 DNA;針對 Gram-negative bacteria,濃度約 0.03 M NaOH 即可有效使細胞壁與膜結構鬆散,釋放核酸,接續以 SDS 和 potassium acetate 中和、沉澱即獲得純化 DNA (pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。此法快速、可靠,適用於多種 Gram-negative 菌株。

  • 選項B
    「從檢體中執行核酸萃取,只能萃取出 DNA 或是 RNA 的其

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