113年:(醫檢)檢驗(2)
下列何種高通量基因定序平台,在文庫建構(library construction)之後,不需要用到聚合酶連鎖反應(polymerase chain reaction, PCR)大量增幅(amplification)?
AMiSeq(Illumina)
BiSeq(Illumina)
CSequel(PacBio)
DIon Torrent(ThermoFisher)
詳細解析
本題觀念:
探討不同高通量定序平台在文庫建構後,是否需要進行PCR擴增(library amplification),以準備最終的測序模板。
選項分析
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選項A MiSeq(Illumina)
Illumina MiSeq平臺在flow cell上需進行橋式PCR(bridge amplification)以產生cluster,這是其產生足夠信號強度以供Sequencing-by-Synthesis的方法之一;即使有PCR-free文庫建構試劑盒,測序過程仍仰賴cluster amplification (yuzuki.org)。因此MiSeq不符合題意。 -
選項B iSeq(Illumina)
iSeq同屬Illumina家族,其文庫建構後在芯片上亦須進行cluster amplification(稱作“clustering”或“on-board amplification”),並非直接以單分子模板測序 ([support.illumina.com](https://support.illumina.com/support-content/Am
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