113年:(醫檢)檢驗(1)

下列何者最不適用於分析增幅阻礙突變系統(amplification refractory mutation system, ARMS)的產物?

Aagarose gel electrophoresis(AGE)
Bcapillary electrophoresis(CE)
Cpolyacrylamide gel electrophoresis(PAGE)
Dpulse-field gel electrophoresis(PFGE)

詳細解析

本題觀念

增幅阻礙突變系統(ARMS,又稱 allele-specific PCR)利用3′端序列錯配抑制非目標序列擴增,只在帶有特定等位基因時產生短小PCR amplicon(通常100–500 bp)。關鍵在於選擇合適的電泳技術分離與檢測這些小片段。

選項分析

  • 選項A: agarose gel electrophoresis(AGE)
    AGE能有效分離100–10,000 bp之DNA片段,操作簡便且ARMS開創文獻即採用AGE觀察擴增條帶,適用於ARMS產物分析。

  • 選項B: capillary electrophoresis(CE)
    CE(又稱CG-electrophoresis)於100–1,000 bp範圍內具有高解析度與自動化優勢,文獻已將ARMS-PCR與CE結合,實現快速、高通量的點突變偵測,適用。

  • 選項C: polyacrylamide gel electrophoresis(PAGE)
    PAGE提供5–500 bp高解析度,適合分辨單核苷酸差異的PCR產物,經常用於SNP檢測及小片段分離,適用。

  • 選項D: pulse-field gel electrophoresis(PFGE)
    PFGE專為分離10 kb至Mbp等級的大型基因組DNA設計,利用電場切換實現大片段分離;

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