111年:(醫檢)檢驗(2)
下列何者最不適用於偵測基因中單一核苷酸點突變（ point mutation ）？
A增幅阻礙突變系統（ amplification refractory mutation system, ARMS ）
B等位基因特異性寡核苷酸雜交（ allele-specific oligonucleotide hybridization, ASO ）
C增幅限制酶切位點（ amplified created restriction sites, ACRS ）
D原位螢光雜交法（ fluorescence in situ hybridization, FISH ）
詳細解析
本題觀念：
本題探討各種分子生物學技術對單一核苷酸點突變（point mutation）偵測的適用性。重點在於比較以PCR為基礎的allele-specific方法（如ARMS、ASO、ACRS）與原位雜交（FISH）方法在辨識單一鹼基變異時的靈敏度和專一性差異。
選項分析
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選項A 增幅阻礙突變系統（ARMS）
ARMS屬於allele-specific PCR，利用3′端末端與突變野生型序列完全互補或不互補的引子，在特定條件下僅對目標allele進行擴增。對單一鹼基差異可達到高敏感度和專一性，常用於KRAS、BRAF V600E等突變檢測(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。因此，ARMS非常適合點突變偵測。 -
選項B 等位基因特異性寡核苷酸雜交（ASO）
ASO雜交先以PCR擴增含變異位點的片段，然後與設計於突變或野生型序列的短探針進行雜交，僅完全互補者可在嚴苛洗脫條件下保留信號。此法可快速篩檢已知突變，靈敏度可達9–13 bp探針區分單鹼基差異，廣泛用於CFTR、α/β地中海型貧血等([pubmed.ncbi.nlm.nih.gov](https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov
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