112年:(醫檢)生化(1)
關於常用之蛋白質二維電泳(two-dimensional electrophoresis)的敘述,下列何者較為正確?
A第一維分離通常是 SDS-PAGE
B第一維以胺基酸序列分離蛋白
C第二維以分子量大小分離蛋白
D第二維的膠體需有 pH 梯度
詳細解析
本題觀念:
蛋白質二維電泳(two-dimensional electrophoresis, 2-DE)透過兩階段獨立的電泳分離,先以等電聚焦(isoelectric focusing, IEF)依蛋白質之等電點(pI)分離,再以 SDS-PAGE 按分子量(molecular weight)分離,以達到高解析度的蛋白體譜分析(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。
選項分析
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選項A
認為「第一維分離通常是 SDS-PAGE」,然而實際上第一維為等電聚焦(IEF),透過pH梯度凝膠使蛋白質移動至其pI位置停住,並非 SDS-PAGE 分子量分離(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov),故此選項錯誤。 -
選項B
指「第一維以胺基酸序列分離蛋白」。雖然蛋白質之pI與其胺基酸殘基組成相關,但IEF 並非以胺基酸序列排序,而是以整體淨電荷(等電點)分離,並非直接比對序列,故選項不符事實。 -
選項C
表示「第二維以分子量大小分離蛋白」。第二維採用
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