113年:藥學二(第2次)
有關HPLC含量測定之內標(internal standard),下列敘述何者錯誤?
A加入內標是為了消除注入量及檢測器的誤差
B內標宜與分析物結構近似
C內標的濃度,宜與分析物相近
D內標一旦確定,可一體適用於不同檢品分析
詳細解析
本題觀念:
本題考查的是高效液相層析法(HPLC)中**內標法(Internal Standard Method)**的基本原理、選擇條件及其應用限制。
選項分析
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A. 加入內標是為了消除注入量及檢測器的誤差:正確。
- 內標法的主要目的就是校正操作過程中的系統性誤差。由於內標物與分析物在同一個樣品瓶中被混合並同時注入層析儀,若發生注入體積不精確(如氣泡、針筒誤差)或檢測器響應波動(如光源強度改變),內標物與分析物的訊號會受到相同程度的影響。因此,計算兩者的「訊號比值(Peak Area Ratio)」可以抵消這些誤差,提高分析的精確度(Precision)。
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B. 內標宜與分析物結構近似:正確。
- 理想的內標物應具有與分析物相似的物理化學性質(如極性、溶解度、pKa等),這樣在樣品前處理(如萃取、過濾)及層析過程中,內標物的行為(回收率、流失率)才會與分析物一致,進而有效校正樣品製備過程中的誤差。
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C. 內標的濃度,宜與分析物相近:正確。
- 為了確保檢測器的線性反應範圍(Linear Dynamic Range)一致,並避免訊號差異過大導致積分誤差,內標物的濃度(及其產生的訊號強度)通常建議調整至與分析物濃度相近,或至少在同一數量級內。一般建議內
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