111年:藥學二(第2次)
有關螢光測定法之敘述,下列何者錯誤?
A檢品濃度不應太高
B溶液含氯離子時,會降低螢光強度
C檢測溫度與螢光強度有關
D在caffeine存在時, riboflavin 的螢光強度會增強
詳細解析
本題觀念:
本題考查的是螢光光譜法 (Fluorometry) 的基本原理及其影響因素。螢光分析法的靈敏度極高,但其螢光強度 () 容易受到多種因素的干擾,包括檢品濃度(自我與內濾效應)、環境因素(溫度、pH值、溶劑)、以及共存物質(如呈現螢光熄滅作用的離子或分子)。
選項分析
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A. 檢品濃度不應太高:正確。
- 螢光強度 與濃度 在低濃度下呈線性關係 ()。
- 當濃度過高時(通常 M 或吸光度 ),會發生內濾效應 (Inner filter effect) 或自我熄滅 (Self-quenching)。激發光在穿透樣品時被高濃度分子吸收,導致偵測器接收到的螢光強度不再隨濃度線性增加,甚至可能下降。因此,螢光測定通常在稀釋溶液中進行。
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B. 溶液含氯離子時,會降低螢光強度:正確。
- 這是螢光分析中常見的熄滅作用 (Quenching) 範例。鹵素離子(如 、、)是常見的碰撞熄滅劑 (Collisional quenchers)。
- 最經典的例子是奎寧 (Quinine),其螢光強度會被氯離
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